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ELISA试剂盒免疫检测技术
时间: 2022-03-16 09:12:15
       ELISA试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA).已知浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将生物素标记的抗体同时温育。洗涤后,加入亲和素标记过的HRP。ELISA试剂盒再经过温育和洗涤,去除未结合的酶结合物,然后加入底物A、B,和酶结合物同时作用。ELISA试剂盒产生颜色。颜色的深浅和样品中的浓度呈比例关系。 
1. 包被:用0.05MPH9.牰碳酸盐包被缓冲液将抗体稀释至蛋白质含量为1~10μg/ml。在每个聚苯乙烯板的反应孔中加0.1ml,4℃ 过夜。次日,弃去孔内溶液,用洗涤缓冲液洗3次,每次3分钟。(简称洗涤,下同)。 

2. 加样:加一定稀释的待检样品0.1ml于上述已包被之反应孔中,置37℃ 孵育1小时。ELISA试剂盒然后洗涤。(同时做空白孔,阴性对照孔及阳性对照孔)。 

3. ELISA试剂盒加酶标抗体:于各反应孔中,加入新鲜稀释的酶标抗体(经滴定后的稀释度)0.1ml。37℃ 孵育0.5~1小时,洗涤。 

4. 加底物液显色:于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分钟。 

5. ELISA试剂盒终止反应:于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml。 
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