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人ELISA试剂盒的使用方法及使用注意事项介绍
时间: 2023-01-13 09:24:17
      但只要按要求去做,就十分简单明了,并容易掌握。尤其是该方法不需要花费大量的时间作野外观察,它供试所采集的材料可收集起来并存一段时间,特别适用于一些只取食汁液而不取食猎物硬壳的捕食者胃内含物分析,因为猎物的坚硬部分没有留在捕食者消化道或排泄物内。
人ELISA试剂盒的使用首先应平衡至室温再试验
1. 加入50ul标准品、血清标本于相应反应板孔中。
2. 每孔加入100ul酶联物,轻轻混匀30秒(重要),室温60分钟。
3. 洗板:甩尽板内液体,用蒸馏水或者洗涤液(普通洗涤液,自配)洗涤反应板,并去除水滴(在厚叠吸水纸上拍干);这样反复洗涤5次。
4. 每孔加入100ul显色液, 轻轻混匀10秒,室温20分钟。
5. 每孔加入50ul终止液。轻轻混匀30秒;30分钟内在450nm处读OD值。
以OD值为纵坐标,以标准品浓度为横坐标,绘制标准曲线。根据血清样品的OD值可在标准曲线上查出其浓度。
人ELISA试剂盒的使用注意事项介绍:
1、冻结标本溶解后,蛋白质局部浓缩,分布不均,应充分混匀宜轻缓,避免气泡,可上下颠混合,不要在混匀器上强烈震荡。
2、若显色过浅,可适当延长底物温育时。
3、实验严格按照说明书的操作进行,实验结果判定必须以酶标仪读数为准。
4、标本宜在新鲜时检测。如有细菌污染,菌体中可能含有内源性HRP,也会产生假阳性反应。保存过久可发生聚合在人ELISA试剂盒中可使本底加深。
5、酶标包被板开封后如未用完,应立即装入密封袋中加干燥剂保存。
6、浑浊或有沉淀的标本应先离心或过滤,澄清后再检测。
7、反复冻融会使蛋白效价降低,所以代测样本如需保存作多次检测,宜少量分装冰存。
8、建议所有的标准品、样本和空白对照都做双份检测,取平均值,以减小实验误差。
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