用ELISA试剂盒做实验虽说,但是操作技术的影响也是检测结果的关键因素之一,操作者得细心,用心。下面公司技术人员总结了几点,想做ELISA试剂盒实验的同学快来瞧瞧吧!
一、将液体加到酶标孔中时,避免枪头和孔内液体接触,可使枪头上的液滴和孑L壁接触,液滴会自然流下去。吸入液体时的的方法是吸两档打一档,防止由于枪头的毛细作用使得部分液体不能流出而造成的误差。
二、液体全部加入酶标孔后,将酶标板放在桌子上平行轻轻摇晃30s,使液体充分混合均匀,也使其得到充分的反应。
三、尽量做双孔实验,这样才既能保证数据的准确性,又能反映出试剂盒的精密度。
四、手工洗板时每次加入洗涤液后。应静置15~30s,
ELISA试剂盒不要将一个酶标孑L中的洗涤液溅入另一酶标孔中,防止交叉污染。甩去洗涤液后将酶标板放在毛巾或吸水纸上拍干。
五、由于底物显色剂对光及其敏感,因此要避光保存。
六、实验前30min将试剂盒中的所有试剂从冰箱取出,使试剂盒中的所有试剂与提取好的样品溶液的温度相同,酶标板只要取出所需量。
七、检测吸光度前应将酶标仪打开,将其预热30min以上。
八、孵育时要使盖板膜封好酶标板,防止水分蒸发,以防曲线不成线性。
九、底物为TMB,避免与皮肤相接触。终止液为2tool的浓硫酸具有腐蚀性,应尽量避免接触皮肤。
十、要确保微量加样器的准确性,
ELISA试剂盒可以使用蒸馏水和电子天平进行确定(由于蒸馏水不含杂质,温度环境为20%左右时,lmL的水可以看作是lg、20L的水可以看作是0.2g)每一把微量加样器都应该将其zui高量程和低量程进行确定。