ELISA试剂盒的设置规范曲线样品的规范浓度规划要有一个比较大的跨度,并且要能包括你所要检测试验样品的浓度,即样品的浓度要在规范曲线浓度规划之内,包括上限和下限,而关于呈S型的规范曲线,ELISA试剂盒尽量要使试验样品的浓度在中间斜度及陡段,即曲线简直成直线的规划内。
使小珠在流水冲击下不断地翻滚淋洗,持续冲刷2分钟后,吸干液体,再用蒸馏水浸泡2分钟,吸干即可。浸泡式犹如盆浴,流水冲刷式则比方淋浴,其洗刷效果更为完全,且也简练、快速。已有试验标明,流水冲刷式相同也适用于微量滴定板的洗刷。洗刷时设法加大水流量或加大水压,让水流冲击板孔外表,洗刷效果更佳。
浸泡式:吸干或甩干孔内反响液;用洗刷液过洗一遍(将洗刷液注满板孔后,即甩去);浸泡,行将洗刷液注满板孔,放置1-2分钟,间歇摇晃,浸泡时刻不可随意缩短;吸干孔内液体。 ELISA试剂盒吸干应完全,可用水泵或真空泵抽吸,也可甩去液体后在清洁毛巾或吸水纸上拍干;洗刷3-4次,或按说明规则。在间接法中如本底较高,可增加洗刷次数或延伸浸泡时刻。
用倍比稀释法制造规范曲线中的规范样品浓度,这样就可以确保规范样品的浓度不会呈现较大的违反。样品的浓度等目标是根据规范曲线计算出来的,所以要把做规范曲线看作是比做正式试验还要重要的一件事,否则后边的试验效果无从谈起。做出的规范曲线相关系数因试验要求不同而有所改变,但一般来说,相关系数R至少要大于0.98, ELISA试剂盒关于有些试验,至少要0.99甚至是0.999。检测规范样品时,应按浓度递加次序进行,以削减高浓度对低浓度的影响,进步准确性。规范曲线的样品数一般为7个点,但至少要确保有5个点。