大鼠ELISA试剂盒

1. 从大鼠ELISA试剂盒室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回4℃。

2. 设置标准品孔、样本孔和空白孔，空白孔什么都不加；标准品孔各加不同浓度的标准品50μL。

3. 待测样本孔先加待测样本10μL，再加样本稀释液40μL。

4. 大鼠ELISA试剂盒随后标准品孔和样本孔中(空白孔不加)加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体50μL，大鼠ELISA试剂盒用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育60min。

5. 弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。

6. 所有孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。

7. 所有孔加入终止液50μL，15min内，在450nm波长处测定各孔的OD值。

操作注意事项

1. 大鼠ELISA试剂盒保存在2-8℃，使用前室温平衡20分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶，这属于正常现象，水浴加热使结晶溶解后再使用。

2. 实验中不用的板条应立即放回自封袋中，密封(低温干燥)保存。

3. 预处理后的样本无需稀释，直接取10μL加样即可。

4. 严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。

5. 所有液体组分使用前充分摇匀。