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人ELISA试剂盒实验之前该如何选择
时间: 2023-11-02 10:51:56

如何在实验中选择符合科研要求的产品同时并且要求高品质的人ELISA试剂盒,使实验结果更标准,晶抗生物为你做出来一下总结,大家一起来看看吧!

人ELISA试剂盒

1 查找待测样本的蛋白浓度

通过检索SCI文献、获得目标蛋白的表达部位及表达浓度参考值,比较人ELISA试剂盒中给出的样本测值与参考值是否一致。


2 明确人ELISA试剂盒的应用种属检测的样本类型

不同厂家验证的样本类型不同。除试剂盒特别说明外,一般情况下,不同种属不能通用。常见待测样本类型有:血清、血浆、细胞上清、组织匀浆、细胞裂解液等。实验前,需要判断试剂盒能否满足目标物种的目标蛋白检测。


3 明确人ELISA试剂盒的检测范围

试剂盒的检测范围即标准曲线范围。标准曲线范围不等同于样本浓度范围,所以,要特别注意判断待测样本浓度是否落在标准曲线范围内。对于浓度很高的样本,建议先通过预实验,摸索出合适的稀释倍数后,再大量测定样本。


4 明确人ELISA试剂盒的国际质控标准

Ⅰ 稀释线性

一般指样本稀释线性,即:将样本梯度稀释,看各稀释梯度浓度是否成线性;对于高浓度样本,建议选择OD值落在标曲范围中部的稀释倍数为稀释倍数。


Ⅱ 回收率

评估人ELISA试剂盒测量结果趋于真实值程度的指标。一般添加标准品(重组蛋白)到天然样本基质内,进行测定。通常,线性及回收率的范围在80%-120%比较合适。


Ⅲ 天然样本检测

确保人ELISA试剂盒可以检测天然样本及合适的样本类型。可根据靶蛋白性质对天然样本进行选择,例如:血清、血浆、细胞上清、尿液、唾液和乳汁等。


Ⅳ 交叉反应

通过交叉反应评估人ELISA试剂盒的特异性。交叉反应越小,说明试剂盒的特异性越好。

①与同家族其他蛋白或结构类似物的交叉反应。

②与其他种属相同靶点蛋白的交叉反应。

③与血清中常见因子的交叉反应。


Ⅴ 干扰试验

判断其他分子与抗原-抗体对之间相互作用的影响。干扰性越大,待测物测定值越不准确。

①评估靶蛋白配体的干扰。

②评估靶蛋白受体的干扰。


Ⅵ 稳定性

判定试剂盒在规定条件下储存时间长短的标准。一般通过热加速稳定性实验验证。

①将人ELISA试剂盒在37℃条件下放置7天,与4℃条件下放置的相同产品进行比较。

②各项性能检测结果的偏差均应<15%。


Ⅶ  精密度

人ELISA试剂盒重复实验时,误差大小的评估标准。通常用CV表示。一般情况下,批间、批内变异系数(CV)均应<15%。


Ⅷ 检测限

人ELISA试剂盒灵敏度的判定标准。检测限的值越低,表明试剂盒越灵敏。如果待检指标含量很低,需要选择高灵敏度的人ELISA试剂盒。市场上的人ELISA试剂盒常被分为低端、中端和高端三类。


5 选择专业品牌人ELISA试剂盒

选购人ELISA试剂盒时,我们要尽量选择品牌知名度高,在确保产品质量过关的同时,还能获得更优质的售前售后服务。


6 选择性价比高的产品

预算也是选购人ELISA试剂盒产品的要素之一。在保证试剂盒质量可靠的情况下,选择性价比高的产品。生物学是极其严谨的科学,实验结果的准确性是项目基金、文章等评审必不可少的因素。


上海晶抗生物工程有限公司具有良好的市场信誉,我们有一支由生物技术、化学、精细化工等专业毕业的大学生组成的专业的销售和技术服务团队,过硬的产品、合理的价格、优质的服务为不同类型的客户提供最专业的实验室配备解决方案。

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