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晶抗生物细胞培养详细操作步骤
时间: 2023-11-29 09:53:13

      细胞培养技术是细胞学、遗传学、免疫学、实验医学和肿瘤学等多种学科研究的基础实验技术之一。通过细胞培养可以直接观察活细胞的形态结构和生命活动,联合各种技术进行各种物理、化学生物的研究。

细胞

细胞培养操作指南
1.收到常温细胞后,及时拍照记录有无漏液/瓶身破损现象。
2.用75%酒精擦拭细胞培养瓶表面,显微镜下观察细胞状态。先不要打开培养瓶盖,将细胞置于细胞培养箱内静置培养2-4小时,以便稳定细胞状态。
3.仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如贴壁特性(贴壁/悬浮)、细胞形态、所用基础培养基、血清比例、所需细胞因子、传代比例、换液频率等。
4.静置完成后,取出细胞培养瓶,镜检、拍照,记录细胞状态(所拍照片 将作为后续服务依据);建议细胞传代培养后,定期拍照、记录细胞生长状态。
5.若观察到异常或者对细胞有疑问,请及时跟我们联系;对于细胞培养操作及培养。可跟我们的技术支持交流。

细胞保存:

1.冻存液:92%完全培养基+8%DMSO(可以根据实验室条件自行选择)

2.降温步骤:4度10min,-20度2h,-80过夜后液氮保存。

小提示:

1.细胞经过运输后,部分细胞由于温度变化及剧烈碰撞死亡破碎形成碎片,是正常现象。贴壁细胞可以消化,悬浮细胞直接混匀收集细胞,900-1000rpm(约150g)离心3min,弃上清。加5ml PBS重悬细胞,再900-1000rpm(约150g)离心3min,用新鲜的完全培养基重悬接种到新的培养瓶。第二次PBS重悬是为了去除碎片,如果平时碎片比较少,传代时可以省略PBS重悬的步骤;如果碎片很多,建议PBS多洗几次。

2.细胞生长不均时,可以将细胞消化吹散后加入新的培养基重新接种或传代。

3.细胞生长缓慢时,可以选择提高血清浓度培养(不超过20%),也可以根据细胞生长状态,选择传代细胞到新的培养瓶中继续培养。

4.不同细胞贴壁性差异比较大,所以消化时间差别较大,20s-10min均有可能,具体以细胞消化到相互分离但未脱落,并可以轻轻吹下为准,严禁消化到细胞完全漂浮。客户消化过度导致细胞死亡、漂浮、生长缓慢,不提供免费售后服务。

5.干冰发货均为两支,客户先复苏一支,若复苏失败及时联系我方并在我方指导下复苏第二支。若客户同时复苏两支均状态不佳,我方不提供免费售后服务。

6.细胞状态正常时,应尽快冻存细胞保种,冻存后应随机抽取一支检测冻存效果。我方不对客户冻存细胞导致死亡负责,客户冻存细胞死亡不提供免费售后服务。

      客户收到细胞有任何疑问请及时致电我们,细胞收到后1周内没有任何电话,或其他形式回访,默认为细胞质量没问题,之后出了任何问题不给予免费售后。细胞免费售后只提供一次,若重发后再次培养死亡不再免费补发,细胞收货时已经死亡或密度不足的除外。

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