人ELISA试剂盒的使用已经日益频繁,人ELISA试剂盒使用方法也是很简单的,但是很多用户还是反应,在试验的时候会遇到一些问题。基础是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性,酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性,又保留酶的活性。
人ELISA试剂盒的样本收集与运输:
利用人ELISA试剂盒进行检验常见的样本一般包括血液(指血,静脉血),尿,粪便,脑脊液,胸腹水,前列腺液等,这些样本收集的时间、方法和保存都有一定的要求。
人ELISA试剂盒实验中的血清需采用血管收集血液,室温血液自然凝固30分钟,1000xg离心15分钟左右,收集上清,分装后,标好号,-20°C或-80°C保存。运输是用干冰。(注:一个样本检测一个指标至少需要40ul血清,您是一个样本检测4个指标,至少需要160ul血清,多准备一些。)光镜:肝脏组织4%多聚甲醛固定后密封,4度或者常温保存即可,运输时用冰袋。
电镜:一定要是新鲜的组织加到新鲜配置的2.5%戊二醛中固定后,4度保存,电镜所需的组织块不需要太大,米粒大小即可,运输时用冰袋即可。
人ELISA试剂盒免疫组化:
取适当的组织放于4%的多聚甲醛中固定,密封,避光,四度或常温保存,运输时加冰袋即可。
RT-PCR和WB:取下肝脏组织,置于-80或者液氮中保存,运输时用泡沫保温盒加干冰。
人ELISA试剂盒注意事项:
血清标本宜在新鲜时检测。如有细菌污染,菌体中可能含有内源性HRP,也会产生假阳性反应。如在冰箱中保存过久,其中的可发生聚合,在间接法人ELISA试剂盒中可使本底加深。一般说来,在5天内测定的血清标本可放置于4℃,超过一周测定的需低温冰存。冻结血清融解后,蛋白质局部浓缩,分布不均,应充分混匀宜轻缓,避免气泡,可上下颠倒混和,不要在混匀器上强烈振荡。混浊或有沉淀的血清标本应先离心或过滤,澄清后再检测。反复冻融会使抗体效价跌落,所以测抗体的血清标本如需保存作多次检测,宜少量分装冰存。保存血清自采集时就应注意无菌操作,也可加入适当防腐剂。