产品名称 |
Hoechst33342/PI细胞凋亡染色试剂盒 |
产品编号 |
JLC0612 |
产品规格 |
100T |
产品价格 |
290 |
产品有效期 |
6个月 |
产品保存条件 |
-20℃ 避光 |
产品介绍 |
Hoechst33342/PI细胞凋亡染色试剂盒(Hoechst 33342/PI Apoptotis Assay Kit)是一种采用Hoechst 33342和碘化丙啶(Propidium Iodide,PI)双荧光染色方法进行细胞周期与细胞坏死分析的检测试剂盒。单纯的PI染色能够观察DNA直方图上凋亡细胞的亚G1峰,但只能代表G0/G1期发生凋亡,无法观察S期和G2期发生的细胞凋亡,而且细胞经过固定后无法对活细胞和死细胞进行区分。Hoechst 33342可以穿透细胞膜,进入正常细胞和凋亡细胞与DNA结合,能在紫外线下显示蓝色荧光,而且染色后凋亡细胞荧光会比正常细胞明显增强。PI不能穿透细胞膜,对于具有完整细胞膜的正常细胞或凋亡细胞不能染色。而对于坏死细胞,其细胞膜的完整性丧失,PI可以穿透细胞膜使坏死细胞着色产生红色荧光。 Hoechst 33342/PI双染后,可在流式细胞仪上将正常细胞、凋亡细胞和坏死细胞区别开来。在二元直方图上,正常细胞对Hoechst33342具有拒染性,呈弱蓝色荧光+弱红色荧光(Hoechst 33342+/PI+);凋亡细胞对Hoechst33342具有嗜染性呈强蓝色荧光+弱红色荧光(Hoechst 33342++/PI+);坏死细胞对PI具有嗜染性,呈弱蓝色荧光+强红色荧光。本试剂盒亦可用荧光显微镜进行观察,检测细胞含量范围一般为0.1~1×106之间。 自备材料: 胰蛋白酶消化液 流式细胞仪或荧光显微镜 PBS 细胞计数板 染色结果:在蓝色荧光对红色荧光的散点图上,正常细胞呈低蓝光/低红光,凋亡细胞呈高蓝光/低红光,坏死细胞呈低蓝光/高红光。 注意事项: 荧光染料都存在淬灭的问题,建议染色后尽快检测。 在为了获得细胞沉淀的离心的过程中,对于特殊细胞,如果细胞沉淀不充分,可以适当提高离心力或延长离心时间。 Heochst 33342与细胞孵育的时间不宜过长,一般控制在20min以内。太长容易引起Heochst 33342的发射光谱由蓝光向红光迁移,导致红色荧光与兰色荧光的比例改变。 如果用于组织的细胞周期与细胞凋亡检测,则必须把组织消化后,制备成单细胞悬液,才可以进行检测 PI对人体有一定刺激性,请注意适当防护。 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。 |
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