产品名称 |
一步法感受态细菌制备试剂盒 |
产品编号 |
JLC-SJ2242 |
产品有效期 |
12个月 |
产品保存条件 |
4℃ |
产品介绍 |
将质粒DNA导入细菌细胞是克隆的基础,转化感受态细菌有多种方法,如氯化钙法、电转化法等。一步法感受态细菌制备液属于化学转化法,可以快速的进行制备和转化,转化效率较氯化钙法稍低或相当,经无菌处理,用于质粒DNA导入细胞。 操作步骤(仅供参考): 接种一个单菌落于50ml LB培养基中,37℃中速(200~250r/min)摇床过夜。按1:100的比例将过夜培养的菌液加入到新鲜的LB培养基,继续培养至OD600为0.3~0.4。 加入等体积的预冷的一步法感受态细菌制备液中,冰上温和的混匀。 菌液分成小份,迅速冻存,于-70℃长期保存。进行转化时,冻存菌液应缓慢融化。 迅速融化冻存菌,将100μl感受态细菌和1~5μl DNA(0.1~100ng)加入到预冷的EP管中,4℃放置10~60min。 加入1ml Lea感受态培养液,37℃温和振荡培养30~60min。 凃板于LB平板上,培养,挑取单克隆,鉴定并保存。 注意事项: 注意无菌操作,避免微生物污染。 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。 |
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