• 海藻糖6磷酸合成酶(TPS)测试盒/分光光度法
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    TPS

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海藻糖6磷酸合成酶(TPS)测试盒

分光光度法:50管/48样

注 意:正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定

测定意义:

海藻糖是由两个葡萄糖分子以α,α-1-1 糖苷键连接而成的一种非还原双糖,广泛存在于细菌、酵母菌、霉菌、食用菌、低等植物、昆虫、无脊椎动物和高等植物等多种有机体中。海藻糖的非还原性决定了它对酸、碱、高温等的稳定性。另外,它本身具有很强的吸水性,使它在生物体内具有抗脱水作用,在逆境条件下可通过识别外界刺激、产生和传递信号、基因表达和代谢调节来保护植物免受不良环境的伤害。

植物体内主要以葡萄糖为底物合成海藻糖,该反应首先在海藻糖-6-磷酸合成酶(trehalose-6-phosphate synthase,TPS)的作用下,催化尿苷二磷酸葡萄糖(UDPG)和 6-磷酸葡萄糖反应生成中间产物6-磷酸海藻糖,再在海藻糖-6-磷酸磷酸酶 (trehalose6-phosphate phosphatase,TPP)的作用下去磷酸化,生成海藻糖。因此,测定TPS活性对于研究植物逆境具有重要意义。

测定原理:

TPS 催化 UDPG 与 G6P 生成海藻糖-6-磷酸,同时产生 UDP;UDP 在丙酮酸激酶与乳酸脱氢酶作用下,氧化 NADH 为 NAD+,NADH 的下降速率与 UDP 含量成正比,通过 340nm 吸光度下降速率反映 TPS 活性。

需自备的仪器和用品:

分光光度计、水浴锅、可调式移液器、1mL 石英比色皿、研钵、冰和蒸馏水。


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