SW480人结肠癌细胞(DMEM)
基本信息:
产品品牌 :晶抗生物
中文名称 : 人结肠癌细胞
细胞简称 : SW 480 [SW -480]
细胞形态 : 上皮细胞样
生长特性 : 贴壁细胞
培养环境 : 空气,95% ;CO2,5% 37℃
冻存条件 : 55% 基础培养基+40% FBS+5% DMSO液氮
完全培养基 : DMEM (PM150210)+10% FBS(164210-50)+1% P/S(PB180120)
传代步骤:
1、吸出原培养液。
2、加入2ml左右PBS,轻轻晃动培养瓶润洗细胞,吸出PBS丢弃。
3、加入1ml左右0.25% 胰蛋白酶溶液(含ED TA ),轻轻晃动培养瓶使之浸润所有细胞。4、放入培养箱消化,显微镜下看到细胞块中间的细胞明显变圆有间隙时可终止,全程不要拍打培养瓶。
5、加入3ml含血清的培养基终止消化,吹打细胞使之脱壁并在液体里反复吹打使细胞尽量呈单颗细胞的悬浮液。
6、收集细胞悬液离心,1200rpm /min 3分钟,离心完吸出上清丢弃。
7、加入新鲜培养基,吹打几下混匀细胞即可,按比例接种到新培养瓶,补足培养基,拧松瓶盖或使用透气瓶盖进行培养。
传代比例(密度) : 1:2-1:4
消化时间 : 2~ 3分钟
换液频次 : 2~ 3次/周
细胞背景描述:
SW 480 [SW -480]细胞源自原位直肠腺癌,和SW 620细胞源自同一病人一年后的淋巴结转移。CSAp和直肠抗体3阴性;角蛋白免疫过氧化物酶染色阳性。p53基因第273位密码子的G →A突变引起A rg→His替代,309位密码子的C →T突变导致Pro→Ser替代。细胞p53蛋白表达水平提高,癌基因c-m yc、K -ras、H -ras、N -ras、m yb、sis和 fo s的表达呈阳性,癌基因N -m yc的表达未做检测。SW 480 [SW -480]细胞不表达细胞溶解酶,一种与肿瘤入侵相关的金属蛋白酶。有报道称,SW 480 [SW -480]细胞表达G M -C SF。SW 480 [SW -480]细胞 ras原癌基因的12位密码子有一个突变,可以用作PC R 法检测该突变的阳性对照。1978年11月,ALeibovitz将其提交给ATCC时已传代至第91代。
致瘤性 : Yes.Tum orsdeveloped within 21 daysat100% frequency (5/5)in nudemiceinoculated subcutaneouslywith 1×10^7 cells.
倍增时间 : 30-50小时
细胞类型 : 肿瘤细胞
肿瘤类型 : 肠癌细胞
组织来源 : 直肠;结直肠腺癌
受体表达 : epiderm algrow th factor(EG F)
基因表达 : carcinoem bryonic antigen (C EA)0.7 ng/10^6 cells/10 days ; k eratin; tran sfo rming grow th factorbeta,m yc+;m yb+;ras+;fo s+;sis+;p53+;abl-; ros-;src -,HLA A2,B8,B17;Blood TypeA;Rh+,The cellsare positive fork eratinbyim m unoperoxidase staining.,T helineispositive forexpression ofc-m yc,K -ras,H -ras,N -ras,myb,sisand fosoncogenes.
生物安全等级 : 1
供体年龄男性 : 50岁
细胞保藏中心 : ATCC ; C C L-228D SM Z ; ACC-313ECACC ; 87092801
收到常温细胞后如何处理:
细胞培养详细操作步骤请参照晶抗生物细胞培养操作指南
1.收到常温细胞后,及时拍照记录有无漏液/瓶身破损现象。
2.用75% 酒精擦拭细胞培养瓶表面,显微镜下观察细胞状态。先不要打开培养瓶盖,将细胞置于细胞培养箱内静置培养2-4小时,以便稳定细胞状态。
3.仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如贴壁特性(贴壁/悬浮)、细胞形态、所用基础培养基、血清比例、所需细胞因子、传代比例、换液频率等。
4.静置完成后,取出细胞培养瓶,镜检、拍照,记录细胞状态(所拍照片 将作为后续服务依据);建议细胞传代培养后,定期拍照、记录细胞生长状态。
5.若观察到异常或者对细胞有疑问,请及时跟我们联系;对于细胞培养操作及培养注意事项有疑问的,可跟我们的技术支持交流。