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PCR试剂盒
PCR试剂盒

化脓性链球菌(酿脓链球菌)PCR试剂盒
货号：JLC-E7695

英文名：化脓性链球菌(酿脓链球菌)PCR试剂盒

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产品货号	PCR试剂盒	货期	优惠价	数量
JLC-E7695	50次	准现货	询价

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产品信息

艾利希体属（埃立克体属）通用PCR试剂盒
产品及特点：
艾利希体（Ehrlichiae spp.）是一种细小简单的细菌归类为立克次体类的病原体，它是藉由壁虱叮咬狗的皮肤之后，达到传播目的的传染病。是血液及骨髓的细菌性感染疾病，藉由壁虱这类寄生虫传染，可导致贫血、免疫力降低及凝血不良。
1. 即开即用，用户只需要提供DNA模板。
2. 引物经过精心优化，专一性强，只扩增艾利希体属（埃立克体属）通用，与其他病原没有交叉反应。
3. 提供阳性对照，便于区分假阴性样品。
4. PCR mix 中含上样染料，PCR后可以直接上样电泳。
5. 本试剂盒足够做40μL体系的PCR 50次，但只能用于科研。
规格及成分：

编号	成分	规格
试剂一	PCR MagicMix 3.0	1mL（红盖）
试剂二	超纯水	1mL（亮黄色）
试剂三	艾利希体属（埃立克体属）通用PCR引物混合液	100μL（白盖）
试剂四	艾利希体属（埃立克体属）通用PCR阳性对照（1×10E8 /μL）	50μL（黄盖）
试剂五	使用手册	1 份

运输及保存：
低温运输，-20℃保存，保存期限为一年。阳性对照需要单独放置，不要污染其他试剂。
自备试剂：
样品 DNA。
使用方法：
一、样品 DNA 的制备：
1. 用自选方法纯化N+2个样品的DNA，本试剂盒跟市场上大多数核酸提取试剂盒兼容。可以选用本公司柱式病毒 DNAout。
2. 如果有N个样品，则需要做N+2个提取，包括一个样品制备阳性对照和一个样品制备阴性对照。
样品制备阳性对照是在适量水（取决于试剂盒要求的样品起始量）中加 10μL 艾利希体属（埃立克体属）通用PCR 阳性对照的 1000 倍稀释液而得，样品制备阴性对照是直接用水。取结束后得到模板 DNA 放冰上待用。
二、设置PCR反应(40 μL 体系)：
3.对N+2个样品，在PCR时需要增加一个PCR阳性对照和一个PCR阴性对照，故需要设置N+4个反应。在N+4个PCR管中分别加入下列成分：

成份	N+2个样品管	PCR阴性对照	PCR阳性对照
PCR Magic Mix 3.0	各20μL	20μL	20μL
艾利希体属（埃立克体属）通用PCR引物混合液	各2μL	2μL	2μL
N+2个样品DNA模板	各18μL	--	--
PCR阴性对照（水）	--	18μL	--
PCR阳性对照（艾利希体属（埃立克体属）通用PCR阳性对照1000倍稀释液）	--	--	18μL

4.上机进行 RT-PCR，RT-PCR 反应参数为:

过程	温度	时间
逆转录	42℃	30 min
预变性	95℃	5 min
PCR反应35个循环	95℃	30 sec
	58℃	30 sec
	72℃	20 sec
延伸	72℃	7 min

三、电泳检测：
5. 琼脂糖电泳检测扩增效果。如果阴性对照有扩增产物或阳性对照无扩增产物，则说明实验失败，需要分析实验失败的原因。只有在阴性对照没有扩增产物、阳性对照必须有预期条带出现，才有必要分析样品的实验结果，如果有预期片段大小的扩增产物则为阳性，如果无则为阴性。

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