• 化脓性链球菌(酿脓链球菌)PCR试剂盒
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    化脓性链球菌(酿脓链球菌)PCR试剂盒

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  • 产品信息

艾利希体属(埃立克体属)通用PCR试剂盒
产品及特点:
艾利希体(Ehrlichiae spp.)是一种细小简单的细菌归类为立克次体类的病原体,它是藉由壁虱叮咬狗的皮肤之后,达到传播目的的传染病。是血液及骨髓的细菌性感染疾病,藉由壁虱这类寄生虫传染,可导致贫血、免疫力降低及凝血不良。
1. 即开即用,用户只需要提供DNA模板。
2. 引物经过精心优化,专一性强,只扩增艾利希体属(埃立克体属)通用,与其他病原没有交叉反应。
3. 提供阳性对照,便于区分假阴性样品。
4. PCR mix 中含上样染料,PCR后可以直接上样电泳。
5. 本试剂盒足够做40μL体系的PCR 50次,但只能用于科研。
规格及成分:

编号

成分

规格

试剂一

PCR MagicMix 3.0

1mL(红盖)

试剂二

超纯水

1mL(亮黄色)

试剂三

艾利希体属(埃立克体属)通用PCR引物混合液

100μL(白盖)

试剂四

艾利希体属(埃立克体属)通用PCR阳性对照(1×10E8 /μL)

50μL(黄盖)

试剂五

使用手册

1 份

运输及保存:
低温运输,-20℃保存,保存期限为一年。阳性对照需要单独放置,不要污染其他试剂。
自备试剂:
样品 DNA。
使用方法:
一、样品 DNA 的制备:
1. 用自选方法纯化N+2个样品的DNA,本试剂盒跟市场上大多数核酸提取试剂盒兼容。可以选用本公司柱式病毒 DNAout。
2. 如果有N个样品,则需要做N+2个提取,包括一个样品制备阳性对照和一个样品制备阴性对照。
样品制备阳性对照是在适量水(取决于试剂盒要求的样品起始量)中加 10μL 艾利希体属(埃立克体属)通用PCR 阳性对照的 1000 倍稀释液而得,样品制备阴性对照是直接用水。取结束后得到模板 DNA 放冰上待用。
二、设置PCR反应(40 μL 体系):
3.对N+2个样品,在PCR时需要增加一个PCR阳性对照和一个PCR阴性对照,故需要设置N+4个反应。在N+4个PCR管中分别加入下列成分:

成份

N+2个样品管

PCR阴性对照

PCR阳性对照

PCR Magic Mix 3.0

20μL

20μL

20μL

艾利希体属(埃立克体属)通用PCR引物混合液

2μL

2μL

2μL

N+2个样品DNA模板

18μL

--

--

PCR阴性对照(水)

--

18μL

--

PCR阳性对照(艾利希体属(埃立克体属)通用PCR阳性对照1000倍稀释液)

--

--

18μL

4.上机进行 RT-PCR,RT-PCR 反应参数为:

过程

温度

时间

逆转录

42℃

30 min

预变性

95℃

5 min

PCR反应35个循环

95℃

30 sec

58℃

30 sec

72℃

20 sec

延伸

72℃

7 min

三、电泳检测:
5. 琼脂糖电泳检测扩增效果。如果阴性对照有扩增产物或阳性对照无扩增产物,则说明实验失败,需要分析实验失败的原因。只有在阴性对照没有扩增产物、阳性对照必须有预期条带出现,才有必要分析样品的实验结果,如果有预期片段大小的扩增产物则为阳性,如果无则为阴性。

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