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PCR试剂盒
PCR试剂盒

非洲猪瘟病毒PCR试剂盒
货号：JLC-E7821

英文名：非洲猪瘟病毒PCR试剂盒

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产品货号	PCR试剂盒	货期	优惠价	数量
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产品信息

非洲猪瘟病毒PCR试剂盒
产品及特点：
非洲猪瘟病毒(African swine fever, ASF)是由非洲猪瘟病毒病毒(Africanswine fever virus, ASFV)引起猪的一种急性、热性、高度接触传染性疾病，病死率高达 100%，是我国一类动物疫病和世界动物卫生组织规定的必须报告的动物疫病，受到世界各国的高度重视。因此 ASFV 的快速准确鉴定，对该病的预防和检疫有着重要作用，
为此本公司开发了 ASFV 的 PCR 检测试剂盒，它具有下列特点：
1. 即开即用，用户只需要提供DNA模板。
2. 引物经过精心优化，专一性强，只扩增非洲猪瘟病毒，与其他病原没有交叉反应。
3. 提供阳性对照，便于区分假阴性样品。
4. PCR mix 中含上样染料，PCR后可以直接上样电泳。
5. 本试剂盒足够做40μL体系的PCR 50次，但只能用于科研。
规格及成分：

编号	成分	规格
试剂一	PCR MagicMix 3.0	1mL（红盖）
试剂二	超纯水	1mL（亮黄色）
试剂三	非洲猪瘟病毒PCR引物混合液	100μL（白盖）
试剂四	非洲猪瘟病毒PCR阳性对照（1×10E8 /μL）	50μL（黄盖）
试剂五	使用手册	1 份

运输及保存：
低温运输，-20℃保存，保存期限为一年。阳性对照需要单独放置，不要污染其他试剂。
自备试剂：
样品 DNA。
使用方法：
一、样品 DNA 的制备：
1. 用自选方法纯化N+2个样品的DNA，本试剂盒跟市场上大多数核酸提取试剂盒兼容。可以选用本公司柱式病毒 DNAout。
2. 如果有N个样品，则需要做N+2个提取，包括一个样品制备阳性对照和一个样品制备阴性对照。样品制备阳性对照是在适量水（取决于试剂盒要求的样品起始量）中加10μL非洲猪瘟病毒PCR阳性对照的 1000 倍稀释液而得，样品制备阴性对照是直接用水。提取结束后得到模板 DNA 放冰上待用。
二、设置RT-PCR反应(40 μL 体系)：
3. 对N+2个样品，在PCR时需要增加一个PCR阳性对照和一个PCR阴性对照，故需要设置N+4个反应。在N+4个PCR管中分别加入下列成分

成份	N+2个样品管	PCR阴性对照	PCR阳性对照
PCR Magic Mix 3.0	各20μL	20μL	20μL
非洲猪瘟病毒PCR引物混合液	各2μL	2μL	2μL
N+2个样品DNA模板	各18μL	--	--
PCR阴性对照（水）	--	18μL	--
PCR阳性对照（非洲猪瘟病毒PCR阳性对照1000倍稀释液）	--	--	18μL

4.按下表设置 PCR 反应：

过程	温度	时间
预变性	95℃	5 min
PCR反应35个循环	95℃	30 sec
	55℃	30 sec
	72℃	40 sec
延伸	72℃	7 min

三、电泳检测：
5. 取 10-20 μL PCR 产物。电泳检测 PCR 产物。本产品提供的 PCR Mix 在扩增结束后可以直接上样，不需要另外再加 loading buffer。PCR 产物阳性对照必须有 551bp 大小的条带出现，阴性对照必须无任何扩增，否则实验无效。对没有扩增产物的样品，可以稀释 10 倍后重复 PCR 扩增以排除 PCR 抑制剂的感染。

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