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    水痘-带状疱疹病毒PCR试剂盒

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水痘-带状疱疹病毒PCR试剂盒
产品及特点: 
水痘-带状疱疹病毒(Varicella-Zoster Virus,VZV) 是一种儿童初次感染引起水痘,恢复后病毒潜伏在体内,少数病人在成人后病毒再发而引起带状疱疹的病毒。水痘是具有高度传染性的儿童常见疾病,多发于 2~6 岁,传染源主要是患者,患者急性期水痘内容物及呼吸道分泌物内均含有病毒。曾患过水痘的病人引起带状疱疹后,初期局部皮肤有异常感,搔痒、疼痛,进而出现红疹、疱疹,串连成带状,以躯干和面额部为多见,呈单侧分布,病程约 3 周左右,少数可达数月之久,还有可能出现脑脊髓炎和眼结膜炎等并发症。该病毒对人体健康有长期潜在危害,且该病毒可以有效检测野生株和疫苗株,因此水痘-带状疱疹病毒的快速准确鉴定对该病的预防和检疫有着重要作用,本产品是根据 PCR 原理开发的水痘-带状疱疹病毒检测试剂盒,
它具有下列特点: 
1. 即开即用,用户只需要提供DNA模板。
2. 引物经过精心优化,专一性强,只扩增水痘-带状疱疹病毒,与其他病原没有交叉反应。
3. 提供阳性对照,便于区分假阴性样品。
4. PCR mix 中含上样染料,PCR后可以直接上样电泳。
5. 本试剂盒足够做40μL体系的PCR 50次,但只能用于科研。
规格及成分:

编号

成分

规格

试剂一

PCR MagicMix 3.0

1 mL(红盖)

试剂二

超纯水

1 mL(亮黄色)

试剂三

水痘-带状疱疹病毒 PCR 引物混合液

100 μL(白盖)

试剂四

水痘-带状疱疹病毒 PCR 阳性对照(1×10E8 /μL)

50 μL(黄盖)

试剂五

使用手册

1 份

运输及保存:
低温运输,-20℃保存,保存期限为一年。阳性对照需要单独放置,不要污染其他试剂。
自备试剂:
样品DNA。
使用方法:
一、样品 DNA 的制备:
1. 用自选方法纯化N+2个样品的DNA,本试剂盒跟市场上大多数核酸提取试剂盒兼容。可以选用本公司柱式病毒 DNAout。
2. 如果有N个样品,则需要做N+2个提取,包括一个样品制备阳性对照和一个样品制备阴性对照。样品制备阳性对照是在适量水(取决于试剂盒要求的样品起始量)中加 10μL 水痘-带状疱疹病毒PCR 阳性对照的 1000 倍稀释液而得,样品制备阴性对照是直接用水。提取结束后得到模板 DNA 放冰上待用。
二、设置 PCR 反应(40μL 体系):
3. 对N+2个样品,在PCR时需要增加一个PCR阳性对照和一个PCR阴性对照,故需要设置N+4个反应。在N+4个PCR管中分别加入下列成分:

成份

N+2 个样品管

PCR 阴性对照

PCR阳性对照

PCR Magic Mix 3.0

20μL

20μL

20μL

水痘-带状疱疹病毒PCR 引物混合液

2μL

2μL

2μL

N+2个样品DNA模板

18μL

--

--

PCR 阴性对照(水)

--

18μL

--

PCR 阳性对照(水痘-带状疱疹病毒PCR阳性对照1000倍稀释液)

--

--

18μL

4.按下表设置 PCR 反应:

过程

温度

时间

预变性

95℃

5 min

PCR 反应35个循环

95℃

30 sec

55℃

30 sec

72℃

40 sec

延伸

72℃

7 min

三、电泳检测:
5. 取 10-20 μL PCR 产物。电泳检测 PCR 产物。本产品提供的 PCR Mix 在 扩增结束后可以直接上样,不需要另外再加 loading buffer。PCR 产物阳 性对照必须有 551bp 大小的条带出现,阴性对照必须无任何扩增,否则实 验无效。对没有扩增产物的样品,可以稀释 10 倍后重复 PCR 扩增以排除 PCR 抑制剂的感染。

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