一、基本信息

细胞名称

鸭胚肝间质细胞

细胞品牌

江蓝纯生物

种属来源

鸭

组织来源

胚胎肝脏

生长特性

贴壁生长

形态特征

长梭状细胞样

细胞简介

间充质干细胞(Mesenchymal stem cells, MSCs)是来源于早期中胚层的一类多能干细胞, 在体内具有分布广泛, 体外能够大量扩增和免疫原性低等特点, 是一种细胞治疗的理想种子细胞。自20世纪60年代，Friedenstein等发现在人骨髓长期培养中, 存在一种形态类似成纤维细胞的贴壁生长的细胞且移植到小鼠体内具有成骨能力和造血支持作用, 将这种细胞命名为骨髓基质细胞(Bone marrow stromal cells, BMSCs)。到20世纪90年代末, 人们才成功分离一种具有成骨、成软骨和成脂肪能力的细胞, 称之为间充质干细(Mesenchymal stem cells, MSCs)。胎肝是胚胎发育中晚期的主要造血器官，具有特殊的生物学活性。研究表明胎肝间质细胞与骨髓间质细胞一样具有多向分化能力，而且能改善小鼠肾衰模型和糖尿病模型的症状。随后研究者也从其他组织, 如脂肪、脐带、胎盘、肝脏、骨实质和肌肉等中成功分离获得间充质干细胞。作为一类成体干细胞中的间充质干细胞, 目前大部分的研究集中在人及大鼠、小鼠这两种模式动物上, 其他动物的间充质干细胞报道相对较少。选取中国特有家禽品种鸭子为实验材料, 以鸭胚胎肝脏中的间充质干细胞为研究对象, 对其进行分离培养鉴定, 进行增殖能力检测及分化能力鉴定, 为家禽干细胞研究及畜禽遗传资源保存提供借鉴及参考。鸭胚胎肝间质细胞进行慢病毒转染8-12h，连续传13代，采用高浓度含嘌呤霉素培养基（4ug/mL）培养，筛选阳性克隆；筛选出阳性永生化鸭胚胎肝间质细胞。

质量检测

CD44免疫荧光染色为阳性，纯度高于90%，支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性

细胞规格

5x10⁵cells/T25或1mL冻存管

培养基

鸭胚肝间质细胞完全培养基

培养条件

气相：95%空气+5%二氧化碳；温度：37℃

换液频率

每2-3天换液一次

消化液

0.25%胰蛋白酶

细胞货期

5-6周左右

发货方式

复苏发货（免运输费用）/  冻存发货（需加干冰运输费用）

供应范围

仅限于科研实验使用，绝不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用

特别说明

具体操作步骤以随货产品说明书为主

二、细胞培养操作

收货处理

取出T25细胞培养瓶，用75%酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5%CO2，饱和湿度的细胞培养箱中静置3-4h，以稳定细胞状态

传代密度

细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养

传代比例

首次传代建议1：2传代，1:2传代就是1个T25瓶传2个T25瓶或者2个6cm皿。不是1个T25瓶传2个10cm皿

传代方法

1.吸出T25细胞培养瓶中的培养基，用PBS清洗细胞一次；

2.添加0.25%胰蛋白酶消化液1mL至T25培养瓶中，轻微转动培养瓶至消化液覆盖整个培养瓶底后，吸出多余胰蛋白酶消化液，37℃温浴1-3min；倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后，再加入5ml完全培养基终止消化；

3.用吸管轻轻吹打混匀，按1:2比例接种T25培养瓶传代，然后补充新鲜的完全培养基至5mL，置于37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养；

4.待细胞完全贴壁后，培养观察；之后每2-3天换液一次新鲜的完全培养基。

三、注意事项

重要提醒

1.培养基于4℃条件下可保存3-6个月。

2.在细胞培养过程中，请注意保持无菌操作。

3.传代培养过程中，胰酶消化时间不宜过长，否则会影响细胞贴壁及其生长状态。

4.运输用的培养基（灌液培养基）不能再用来培养细胞，请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。

到货须知

1.收到细胞后，首先观察并拍照记录细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，干冰运输的细胞检查干冰是否完全挥发，细胞是否解冻，若有上述现象发生请及时和我们联系。

2.静置完成后，取出细胞培养瓶，镜检、拍照（当天以及第 2,3 天请拍照），记录细胞状态 (所拍照片将作为后续服务依据)；建议细胞传代培养后，定期拍照、记录细胞生长状态。

3.由于运输的原因，部分细胞由于温度变化及剧烈碰撞死亡破碎形成碎片，是正常现象。个别敏感细胞会出现不稳定的情况，请及时和我们联系，告知细胞的具体情况，以便我们的技术人员跟踪回访直至问题解决。

4.仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等，确保细胞培养条件一致，若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题，责任由客户自行承担。

四、售后服务

细胞予重发

1. 细胞运输中遭遇的各种问题，细胞丢失瓶身破损、培养液严重漏液等，重发。

2. 收到细胞未开封，如出现污染状况，重发。

3. 收到细胞3天内，发现污染问题，经核实后，重发。

4. 常温发货的细胞静置2小时后，干冰冻存发货的细胞复苏2天后，绝大多数细胞未存活，经核实后，重发。

5. 常温发货的细胞静置22小时并且未开封或干冰冻存发货的细胞复苏2天后，出现污染，经核实后，重发。

6. 细胞活性问题，请在收到产品3天内给我们提出真实的实验结果，用台盼蓝染色法鉴定细胞活力，经核实后，重发。

细胞不重发

1. 客户操作造成细胞污染，不重发。

2. 客户严重操作失误致细胞状态不好，不重发。

3. 非我们推荐细胞培养体系致的细胞状态不好，不重发。

4. 细胞状态不好，未提供真实清晰的培养前3天的细胞状态照片，不重发。

5. 细胞培养时经其它处理导致细胞出现问题的，不重发。

6. 收到细胞发现问题与客服人员沟通的时间证明大于3天的，不重发。