植物26S蛋白酶体(26SPSM)酶联免疫试剂盒
备注:
1.(96T/48T)打开包装后请及时检查所有物品是否齐全。
2.标准品浓度依次为:200、100、50、25、12.5、0 ng/mL
3.经过大量正常标本检验,标本的正常浓度值均在试剂盒提供的检测范围内,实验过程中直接取50μL样本上样即可。当有部分样本值超过最大标准品浓度时,可用样本稀释液将标本进行适当稀释后再进行实验。
检测前准备工作:
1.请提前20分钟从冰箱中取出试剂盒,平衡至室温。
2.从冰箱中取出的浓缩洗涤液可能有结晶,属于正常现象;放置室温,轻摇均匀,待结晶完全溶解后再配置洗涤液。可将20ml浓缩洗涤液用蒸馏水或去离子水稀释配置成400ml工作浓度的洗涤液,未用完的放回4℃
3.20×洗涤缓冲液的稀释:蒸馏水按1:20稀释,即1份20×洗涤缓冲液加19份蒸馏水。。
实验原理:
试剂盒采用双抗体二步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被植物26S蛋白酶体(26SPSM)捕获抗体包被微孔中,依次加入标本、标准品孵育,加入生物化抗体进行抗体生物素化,经过温育并彻底后加入HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的植物26S蛋白酶体(26SPSM)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),计算样品浓度。
实验所需自备试验器材:
1. 酶标仪(450nm)
2. 高精度加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
3. 37℃恒温箱
4. 蒸馏水或去离子水