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ELISA试剂盒操作分析
时间: 2022-03-02 09:18:36

      目前科研类ELISA试剂盒生产厂家声称各种标本都能检测,但使用后我们发现有些试剂盒对血清和血浆样本的检测效果不好,表现在光值偏低,如RF因子存在的话,光值偏高。产生上述现象的主要原因是杂蛋白较多,成份复杂。所以需要特别的试剂才能消除影响。

      在使用试剂盒的过程,可将已知浓度的蛋白用血清或血浆调配到ELISA试剂盒标定的检测限的最高值的2倍,加入50μl做两孔,一孔补入常规的50μl标准品稀释液,一孔补入50μl样本分析缓冲液,即可区分出效果来,有时候,有些厂家为了达到“消除”的效果,在样本分析缓冲液中加入待测目标蛋白,为了鉴别出这种情况,也可直接加入样本分析缓冲液做一孔,ELISA试剂盒同时做对比,这样可试出试剂盒中的针对血清血浆样本的缓冲液是否真的有效。

这要分几种情况:

1、如厂家没有提供专门用于血清血浆样本的缓冲液,那么只要用已知浓度的待测指标蛋白加入所测种属的血清作为样本加样和用已知浓度的待测指标蛋白加入PBS缓冲液中同时检测对比,即可知道该试剂盒是否可以直接用来测血清血浆样本。
2、如厂家没有提供专门用于血清血浆样本的缓冲液,ELISA试剂盒只是有一个笼统的或统一的稀释液,那么只要用已知浓度的待测指标蛋白加入所测种属的血清直接加样和用已知浓度的待测指标蛋白加入厂家提供的统一的缓冲液中同时检测,也可得出该试剂盒是否可直接用来检测血清血浆样本。
3、如厂家提供专门用于血清血浆样本的缓冲液,可用已知浓度的待测指标蛋白加入所测种属的血清直接加样和用缓冲液按说明书分别加样,ELISA试剂盒也可得出结果。


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