双位点一步法的原理
      ELISA试剂盒双位点一步法使用识别抗原不同位点2个单克隆抗体（McAb）作双抗体夹心法测定。包被一个McAb后，一起参加待检抗原和另一个McAb酶标物，待检抗原上的2个抗原决定簇一起与固相McAb和酶标McAb结合，构成固相McAb-待检抗原-酶标McAb复合物，加底物经过显色反响进行测定。

双位点一步法的操作过程
1、将1个McAb与固相载体衔接，构成固相McAb。洗刷除掉未结合物。
2、一起参加待检标本和酶标McAb，温育，ELISA试剂盒是待检抗原和固相McAb及酶标McAb反响构成双抗体夹心复合物。洗刷除掉未结合物。
3、加底物显色。

双位点一步法的使用
      适用于双抗体夹心法的ELISA试剂盒，有些也可用双位点一步法检测。如HBsAg相同可用此法进行检测，其原理为：将纯化的抗HBs吸附于固相载体外表，参加待检血清（或血浆），一起参加辣根过氧化物酶符号的另一个抗HBs（酶结合物），如血清或血浆中含有HBsAg，则经过温育构成固相McAb-HBsAg-酶标McAb复合物，ELISA试剂盒参加底物，经过显色反响进行测定。若血清或血浆中不含HBsAg，经过洗刷除掉未结合物，加底物后就不显色。