今天上午我司刘经理为新员工分析讲解了ELISA试剂盒实验需要注意哪些?用于传染性病原体的抗原和抗体、肿瘤标志物和特种蛋白等的检测的血清标本的收集则没有时间和体位方面的影响,那么在处理和保存方面要考虑哪些方面呢?
1、要注意避免出现严重溶血。血红蛋白中含有血红素基团,其有类似过氧化物的活性,因此,在以HRP为标记酶的ELISA试剂盒测定中,如血清标本中血红蛋白浓度较高,则其就很容易在温育过程中吸附于固相,从而与后面加入的HRP底物反应显色。
2、样本的采集及血清分离中要注意尽量避免细菌污染,一则细菌的生长,其所分泌的一些酶可能会对抗原抗体等蛋白产生分解作用;二则一些细菌的内源性酶如大肠杆菌的β-半乳糖苷酶本身会对用相应酶作标记的测定方法产生非特异性干扰。
3、标本在保存中如出现细菌污染所致的混浊或絮状物时,应离心沉淀后取上清检测。
4、血清标本如是以无菌操作分离,则可以在2~8℃下保存一周,如为有菌操作,则建议冰冻保存。样本的长时间保存,应在-70℃以下。
5、在冰冻保存的血清标本须注意避免因停电等造成的反复冻融。标本的反复冻融所产生的机械剪切力将对标本中的蛋白等分子产生破坏作用,从而引起假阴性结果。此外,冻融标本的混匀亦应注意,不要进行剧烈振荡,反复颠倒混匀即可。
我公司刘经理还特别提醒注意:
1、不要用其它生产厂家的ELISA试剂盒中的试剂。
2、当混合蛋白溶液时应尽量轻缓,避免起泡。
3、请每次测定的同时做标准曲线,做复孔。
您了解了吗?如果您还有任何疑问或者建议,欢迎来电咨询我司。我司还提供ELISA试剂盒免费代测服务和全程技术指导服务,产品质量保障,价格实惠,是您满意的选择。