细胞中的蛋白质通过合成和降解等活动控制处于恒定状态。为了使细胞更，减少不必要的蛋白质负荷，细胞中的大多数蛋白质都有一个明确定义的半衰期。细胞进化到降解蛋白质的另一个原因是，确保及时清除已经完成工作的蛋白质(如细胞周期蛋白)，避免由于某些蛋白质的构成作用而可能发生的不良影响(如放松管制在细胞周期蛋白的蛋白酶体降解会加速不受控制的癌细胞的扩散)。
一、细胞复苏：
将冻存细胞从液氮中取出后，在37℃水浴锅内不断摇动促进其融化。移人15ml离心管中，加入10ml预热的DMEM*培养基，轻轻吹匀，离心，2000rpmX2min，弃上清液。
二、细胞传代：
加入10ml PBS清洗细胞培养盘，转移至15ml离心管，2000rpmX2min，弃上清液。再加入10ml PBS（经高压灭菌，保存于40C），吹匀，吸取10微升进行计数，按照1×106/盘接种，在含5%CO2的细胞培养箱继续培养。
细胞密度达到80%～90%时，去培养基，10ml PBS清洗2次。放人细胞培养箱3min。转移至15ml离心管。加入10ml PBS清洗细胞培养盘，转移至15ml离心管，2000rpmX2min，弃上清液。
冻存液的配制：70%的培养基+20%FBS+10%DMSO.DMSO要慢慢滴加，边滴边摇。
1.进入细胞间开始细胞培养时，必须严格按照下列步骤操作：
2.确定衣服的袖口已经卷起或者白大褂的袖口已经扎紧。
3.确定所有需要用到的溶液和耗材都放在伸手可及的位置。为了方便单手开启瓶盖，实验开始前可以把所有瓶盖旋松。
4.操作时如果不能肯定所用的耗材是洁净的，必须及时更换。
021-54720761
021-54720761
点我QQ咨询
点我QQ咨询