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elisa是什么检测方法?ELISA检测方法详解!
时间: 2025-02-12 14:29:48

酶联免疫吸附实验(ELISA)是一种基于免疫学原理,利用酶标记抗体或抗原进行定量或定性检测的常用技术。待测样品种类广泛,包括血清、血浆、细胞培养上清、尿液、组织匀浆等。

ELISA的基本原理是将抗原或抗体固定在固相载体(通常是96孔板)表面,然后利用酶标记的抗体(或抗原)与待测样品中的目标抗原(或抗体)进行特异性结合。结合后的酶催化底物发生显色反应,通过酶标仪测量反应产物的吸光度(即光密度,OD值),即可定量或定性分析待测样品中目标物质的含量。

ELISA的类型多样,包括直接法、间接法、夹心法和竞争法等。不同类型的ELISA在操作步骤和抗体/抗原的结合方式上有所不同,需要根据具体的实验目的和待测物质选择合适的ELISA方法。下面晶抗为大家介绍三种常用方法:

间接法。直接法是检测抗体常用方法,例如检测人体内是否存在针对特定病原体的抗体。选择间接法优势在于它可以加强信号,灵敏度高;一种酶标二抗可以用于检测多种不同的一抗,节省成本。缺点就是交叉反应的几率较高,需要选择合适的封闭剂和洗涤条件以降低背景信号。

夹心法。夹心法是检测大分子抗原常用的方法(例如细胞因子、激素),优势是高灵敏,特异性强,抗原无需纯化即可检测。缺点是需要两种针对不同表位的抗体;抗原必须具有至少两个抗体结合位点。

竞争法。竞争法是检测小分子半抗原(药物、激素)的方法。优势可以检测小分子物质和不纯的样本;数据重现性好。缺势是整体的灵敏度和特异性相对较低。

实验结束后,通过酶标仪测出对应的OD值,建立标准曲线计算样本的浓度。

上述是ELISA检测方法介绍,通过本文想必你对elisa是什么检测方法有所了解。ELISA是酶联免疫法,在生物学、医学和食品环境等领域使用比较广泛。希望您对了解ELISA法,助力于自己科研。

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