• SDS-PAGE浓缩胶缓冲液(4×)
  • JLC-SJ2436

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  • 产品信息

产品名称

SDS-PAGE浓缩胶缓冲液(4×)

产品编号

JLCSJ2436

产品有效期

3个月

产品保存条件

4

产品介绍

本试剂为配制SDS-PAGE浓缩胶缓冲液,可用于配制各种浓度的变性及非变性PAGE凝胶,方便、快捷。产品中已加入10%SDS,使用时不用另外加入。

自备材料:

1、 凝胶模具

2Acr-Bis(30%,29:1)

310%APS(过硫酸铵)

4TEMED

5、 蒸馏水

操作步骤(仅供参考)

根据目的蛋白分子量大小选择合适的PAGE分离胶配制浓度,最佳胶浓度请参考附表1

()灌制分离胶(各试剂使用量请参考附表2)

1、参照凝胶模具说明书,装配好凝胶模具。(注:加入上层筛板有助于加样时保持填料与样品均匀接触,是否加入上层筛板可根据实际情况选择。)

2、将不同体积的Acr-Bis(30%,29:1)、分离胶缓冲液和蒸馏水在小烧杯或试管中混合。

3、加入10%APSTEMED,轻轻搅拌使其混匀,避免产生气泡。

4、在凝胶模具中灌入适量分离胶溶液(对于mini-gel,凝胶液加至约距前玻璃板顶端

1.5 cm或距梳齿约0.5cm即可),然后在分离胶溶液上轻轻覆盖一层12cm的水层,

使凝胶表面保持平整。

6、 静置3060min,待分离胶和水层之间出现一个清晰的界面后,表面凝胶已聚合。

()灌制浓缩胶(各试剂使用量请参考附表3)

1、小心倾倒出覆盖在分离胶上的水层。

2、将不同体积的Acr-Bis(30%,29:1)、浓缩胶缓冲液和蒸馏水在一个小烧杯或试管中混

合。

3、加入10%APSTEMED,轻轻搅拌使其混匀,避免产生气泡。

4、将浓缩胶溶液加至分离胶的上面,直至凝胶溶液到达前玻璃板的顶端。

5、将梳子插入凝胶内,避免产生气泡。

6、静置10~20min,等待浓缩胶聚合。

7、待凝胶聚合后,小心地拔出梳子,以免破坏加样孔。

8、进行常规电泳操作。

注意事项:

1、 过硫酸铵配制成10%溶液后应当-20℃保存。应尽量减少室温存放时间以防失效。有效避免失效的方法是分成小份,-20℃保存,用2~3次,剩余的弃用,亦可4℃保存几天。

2TEMED易挥发,使用后请盖紧瓶盖。另外凝胶凝聚的速度和温度及光照关系密切,可通过适当调节TEMED的用量,控制在不同的室内环境下凝胶凝聚的速度。

3、 配制聚丙烯凝胶的过程中,如果室温较低,可以置于37℃放置,加速凝固。

4Acr-Bis(30%,29:1)有轻微神经毒性,请小心操作。

5、 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

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