人小梁网细胞
产品简介 :
产品名称 :人小梁网细胞
产品品牌 :晶抗生物
组织来源 :眼球
产品规格 :5×105cells/T 25细胞培养瓶
细胞简介 :
人小梁网细胞分离自眼球组织。小梁网由角膜基质纤维、后界膜和角膜内皮向后扩展而成,覆盖在巩膜静脉窦的内侧。小梁网细胞在眼内压调节中起着关键作用。小梁网细胞内有特定的神经递质和神经肽受体,其中包括肾上腺素、乙酰胆碱和神经肽Y。青光眼是由于眼内压力升高而造成的一种不可逆致盲眼病,小梁网细胞的体外培养是青光眼病因学研究的重要手段之一。
在小梁网细胞中,一长串的血管活性多肽和生长因子能够触发细胞内信号传导机制,小梁网细胞可合成不同类型的细胞外基质蛋白以及金属蛋白酶。形态学观察可见,刚从组织块长出的原代细胞,形态各异,多数呈星状或不规则形。细胞有胞突,核椭圆形,胞体肥大,胞浆丰富,且可见吞噬颗粒。随着细胞的增生及相互融合为单层,细胞的形态趋于一致。胞浆的色素颗粒及胞突消失,排列紧密呈类似上皮细胞的扁椭圆形或不规则形。胞体透亮,包膜清晰。
方法简介 :
晶抗生物实验室分离的人小梁网细胞采用组织贴块法制备而来,细胞总量约为5×10 5cells/瓶 。
质量检测 :
晶抗生物实验室分离的人小梁网细胞经N SE (神经元特异性烯醇化酶) 免疫荧光鉴定,纯度可达90% 以上,且不含有H IV -1、H BV 、H C V 、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养信息 :
培 养 基 :含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptom ycin等
换液频率 :每2-3天换液一次
生长特性 :贴壁
细胞形态 :梭形、多角形
传代特性 :可传1-2代 传代比例 1:2
消 化 液 :0. 25% 胰蛋白酶
培养条件 :气相 :空气,95% 。C O2,5%
人小梁网细胞体外培养周期有限。建议使用晶抗生物配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的最佳培养状态。
使用方法 :
人小梁网细胞是一种贴壁细胞,细胞形态呈梭形、多角形,在晶抗生物技术部标准操作流程下,细胞可传1-2代。建议您收到细胞后尽快进行相关实验。
客户收到细胞后,请按照以下方法进行操作 :
1. 取出T 25细胞培养瓶,用75% 酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5% C O 2、饱和湿度的细胞培养箱中静置3-4h,以稳定细胞状态。
2. 贴壁细胞消化
1) 吸出T25细胞培养瓶中的培养基,用PBS清洗细胞一次。
2) 添加0. 25% 胰蛋白酶消化液1m L至T 25培养瓶中,轻微转动培养瓶至消化液覆盖整个培养瓶底后,吸出多余胰蛋白酶消化液,37℃温浴1-3min。倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后,再加入5ml完全培养基终止消化。
3) 用吸管轻轻吹打混匀,按传代比例接种T25培养瓶传代,然后补充新鲜的完全培养基至5m L,置于37℃、5% C O 2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养。
4) 待细胞完全贴壁后,培养观察。之后按照换液频率更换新鲜的完全培养基。
3. 细胞实验
因原代细胞贴壁特殊性,贴壁的原代细胞在消化后转移至其他实验器皿(如玻璃爬片、培养板、共聚焦培养皿等)时,需要对实验器皿进行包被,以增强细胞贴壁性,避免细胞因没贴好影响实验。包被条件常选用鼠尾胶原Ⅰ(2-5μg/cm2) ,多聚赖氨酸PLL(0. 1m g/m l),明胶(0. 1% ),依据细胞种类而定。悬浮/半悬浮细胞无需包被。
注意事项 :
1. 培养基于4℃条件下可保存3-6个月。
2. 在细胞培养过程中,请注意保持无菌操作。
3. 传代培养过程中,胰晶抗消化时间不宜过长,否则会影响细胞贴壁及其生长状态。
4. 建议客户收到细胞后前3天每个倍数各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和晶抗生物技术部沟通。由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们晶抗系,详尽告知细胞的具体情况,以便我们的技术人员跟踪、回访直至问题得到解决。