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JLC-E0531 5×105cells 准现货 询价
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小鼠脑微血管周细胞
产品简介 :
产品名称 :小鼠脑微血管周细胞
产品品牌 :晶抗生物
组织来源 :大脑组织
产品规格 :5×105cells/T 25细胞培养瓶


细胞简介 :

小鼠脑微血管周细胞分离自脑微血管。大脑分左右两个半球,大脑皮质(灰质) 覆盖着每个大脑半球的大部分,它是神经元胞体集中的地方。内部则是由神经纤维或髓鞘构成的白质。每一个半球都有三个面,即外侧面(约占整个皮质面积的1/3) 、内侧面和底面(占2/3的面积) 。半球表面有很多深浅不等的沟或裂,沟或裂之间的隆起叫回,它们大大增加了大脑的表面积。大脑外侧面重要的沟、裂有大脑外侧裂、顶枕裂和中央沟。由于三沟裂之界隔,使大脑皮质组分为额叶、顶叶、颞叶、枕叶四大部分。周细胞(pericyte) 又称R ouget细胞和壁细胞,是一种包围全身毛细血管和静脉中内皮细胞的细胞,可以收缩。周细胞嵌入毛细血管内皮细胞的基膜中,通过物理接触和旁分泌信号与内皮细胞进行细胞通讯,监视和稳定内皮细胞的成熟过程。


此外,周细胞还具有调控毛细血管血流量、细胞碎屑清除和吞噬以及血脑屏障渗透性的作用,其多功能性是目前研究的热点之一,所以对血管周细胞的生物学特征、标记物、细胞功能等的研究都为相关研究提供基础资料。周细胞产生手指状的外延以调控毛细血管的血流量。周细胞和内皮细胞之间共同拥有一个基膜,基膜上有多种细胞连接,包括多种整合素、神经钙黏素、纤连蛋白以及接合素。它还参与毛细血管直径的双向调控。毛细血管受损时,周细胞还可增殖,分化为内皮细胞和成纤维细胞。


方法简介 :

晶抗生物实验室分离的小鼠脑微血管周细胞采用中性蛋白酶-胶原晶抗合消化法制备而来,细胞总量约为5×105cells/瓶。


质量检测 :

晶抗生物实验室分离的小鼠脑微血管周细胞经α-SM A 免疫荧光鉴定,纯度可达90% 以上,且不含有H IV -1、H BV 、H C V 、支原体、细菌、酵母和真菌等。


培养信息 :

包被条件 :PLL(0. 1m g/ml) 
培 养 基 :含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptom ycin等
换液频率 :每2-3天换液一次
生长特性 :贴壁
细胞形态 :成纤维细胞样
传代特性 :可传1-3代左右
传代比例 :1:2
消 化 液 :0. 25% 胰蛋白酶
培养条件 :气相:空气,95% 。C O2,5%
小鼠脑微血管周细胞体外培养周期有限。建议使用晶抗生物配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的最佳培养状态。


细胞培养状态 :

发货时发送细胞电子版照片


使用方法 :

小鼠脑微血管周细胞是一种贴壁细胞,细胞形态呈成纤维细胞样,在晶抗生物技术部标准操作流程下,细胞可传1-3代左右。建议您收到细胞后尽快进行相关实验。


客户收到细胞后,请按照以下方法进行操作 :

1. 取出T 25细胞培养瓶,用75% 酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5% C O 2、饱和湿度的细胞培养箱中静置3-4h,以稳定细胞状态。
2. 贴壁细胞消化
1) 吸出T25细胞培养瓶中的培养基,用PBS清洗细胞一次。
2) 添加0. 25% 胰蛋白酶消化液1m L至T 25培养瓶中,轻微转动培养瓶至消化液覆盖整个培养瓶底后,吸出多余胰蛋白酶消化液,37℃温浴1-3min。倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后,再加入5ml完全培养基终止消化。
3) 用吸管轻轻吹打混匀,按传代比例接种T25培养瓶传代,然后补充新鲜的完全培养基至5m L,置于37℃、5% C O 2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养。
4) 待细胞完全贴壁后,培养观察。之后按照换液频率更换新鲜的完全培养基。
3. 细胞收货脱落
1) 收集所有细胞悬液,1000rpm ,离心5min,保留沉淀。
2) 添加0. 25% 胰蛋白酶消化液0. 5m L至离心管中,重悬沉淀,放置于37℃消化3min (或4℃冰箱静置5-7min) 。消化完向离心管内加入5ml完全培养基终止消化。
3) 经1000rpm ,离心5min,丢弃上清,用5ml完全培养基(补加1% FBS,促进贴壁) 重悬沉淀,接种于新的培养瓶内。
4) 待细胞完全贴壁后,培养观察。之后按照换液频率更换新鲜的完全培养基(37℃预热) 。
4. 细胞实验
因原代细胞贴壁特殊性,贴壁的原代细胞在消化后转移至其他实验器皿(如玻璃爬片、培养板、共聚焦培养皿等)时,需要对实验器皿进行包被,以增强细胞贴壁性,避免细胞因没贴好影响实验。包被条件常选用鼠尾胶原Ⅰ(2-5μg/cm2) ,多聚赖氨酸PLL(0. 1m g/m l),明胶(0. 1% ),依据细胞种类而定。悬浮/半悬浮细胞无需包被。


注意事项 :

1. 培养基于4℃条件下可保存3-6个月。
2. 在细胞培养过程中,请注意保持无菌操作。
3. 传代培养过程中,胰酶消化时间不宜过长,否则会影响细胞贴壁及其生长状态。
4. 建议客户收到细胞后前3天每个倍数各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和晶抗生物技术部沟通。由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们晶抗系,详尽告知细胞的具体情况,以便我们的技术人员跟踪、回访直至问题得到解决。

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