产品名称 |
Ehrlich苏木素染色液 |
产品编号 |
JLC0792 |
产品规格 |
500ml |
产品价格 |
690 |
产品有效期 |
24个月 |
产品保存条件 |
RT 避光 |
产品介绍
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苏木素(Hematoxylin)和伊红(Eosin)联合染色简称HE染色,是病理学和组织学最常用的一种染色方法。苏木精为碱性天然染料,可使细胞核着色。细胞核内染色质的主要成分是DNA,在DNA的双螺旋结构中,两条核苷酸链上的磷酸基向外,使DNA双螺旋的外侧带负电荷,呈酸性,很容易与带正电荷的苏木精碱性染料以离子键或氢键结合而被染色。苏木素成熟的方法有自然氧化法、化学氧化法。自然氧化是指暴露于光和空气中,这个过程比较缓慢,约需3~6个月不等,但生成物染色能力可维持很长时间。Ehrlich和Delafield苏木素就属于这种。Ehrlich苏木素作为一种良好的核染色液,也可用于黏蛋白染色如软骨的黏液多糖,骨和软骨的染色也推荐使用Ehrlich苏木素染液。 Ehrlich苏木素染液非常稳定,成熟后密封可保存2年。对核染色质染得很清晰细致,染色时间也稍长,约15~20min。适用于教学和科研上的制片染色,用此染色液对冷冻切片染色则不理想。 染色原理: 细胞核染色的原理: 苏木素为碱性天然染料,可使细胞核着色。细胞核内染色质的成分主要是DNA,在DNA双螺旋结构中,两条核苷酸链上的磷酸基向外,使DNA双螺旋的外侧带负电荷,呈酸性,很容易与带正电荷的苏木素碱性染料以离子键或氢键结合而被染色。苏木素在碱性溶液中呈蓝色,所以细胞核被染成蓝色。 细胞浆染色的原理: 伊红是一种化学合成的酸性染料,在一定条件下可使细胞浆着色。细胞浆的主要成分是蛋白质,为两性化合物,细胞浆的染色与染液的pH值密切相关。当染色液pH值在胞浆蛋白质等电点(4.7~5.0)以下时,胞浆蛋白质以碱式电离,则细胞浆带正电荷,就可被带负电荷的酸性染料染色。伊红在水中离解成带负电荷的阴离子,与胞浆蛋白质带正电荷的阳离子结合,使细胞浆着色,呈现红色。 分化作用: 染色后,用某些特定的溶液将组织过多结合的染色剂脱去,这个过程称为分化作用,所用的溶液称为分化液。在HE染色中常用1%盐酸乙醇作为分化液,因酸能破坏苏木素的醌型结构,使组织与色素分离而退色。大多数组织经苏木素染色后,必须用1%盐酸乙醇分化,使细胞核过多结合的苏木素染料和细胞浆吸附的苏木素染料脱去,再进行伊红染色,才能保证细胞核与细胞浆染色的分明。 返蓝作用: 分化之后,苏木素在酸性条件下处于红色离子状态,呈红色;在碱性条件下处于蓝色离子状态,呈蓝色。组织切片经酸性乙醇分化后呈红色或粉红色,立即用水除去组织切片上的酸而中止分化,再用弱碱性水使苏木素染上的细胞核呈现蓝色,这个过程称为返蓝作用或蓝化作用。另外用自来水浸洗也可使细胞核返蓝,但所需时间较长。 自备材料: 1、盐酸乙醇分化液 2、蓝化液,如稀氨水、碳酸锂溶液等 3、系列乙醇 4、伊红染色液 5、4%多聚甲醛 注意事项: 切片脱蜡应尽量干净。系列乙醇应经常更换新液。 盐酸乙醇分化时间应根据切片厚薄、组织类别以及新旧而定,另外分化后自来水冲洗时间应该足够,以便彻底清洗酸。 蓝化液常使用0.2~1%氨水或Scott促蓝液或0.1~1%碳酸锂溶液。 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。 |
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