• 改良Harris苏木素染色液
  • JLC0794

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  • 产品信息

产品名称

改良Harris苏木素染色液

产品编号

JLC0794

产品规格

100ml/500ml

产品价格

100/380

 产品有效期

6个月

产品保存条件

RT避光

产品介绍

苏木素(Hematoxylin)和伊红(Eosin)联合染色简称HE染色,是病理学和组织学最常用的一种染色方法。苏木精为碱性天然染料,可使细胞核着色。细胞核内染色质的主要成分是DNA,在DNA的双螺旋结构中,两条核苷酸链上的磷酸基向外,使DNA双螺旋的外侧带负电荷,呈酸性,很容易与带正电荷的苏木精碱性染料以离子键或氢键结合而被染色。

改良Harris苏木素染色液是最经典的Harris苏木素染色法的改进。该染色液不含汞,无毒,无氧化膜,细胞核染色质着色深而细微,临床上常替代Harris苏木素染色液,染色时间一般58min。其特点是苏木素被氧化的程度高,染色力强,虽然染色时间短,但是易使细胞核、细胞质、纤维过染,染色后需要盐酸乙醇分化,属于退行性染色。

染色原理:

细胞核染色的原理:

苏木素为碱性天然染料,可使细胞核着色。细胞核内染色质的成分主要是DNA,在DNA双螺旋结构中,两条核苷酸链上的磷酸基向外,使DNA双螺旋的外侧带负电荷,呈酸性,很容易与带正电荷的苏木素碱性染料以离子键或氢键结合而被染色。苏木素在碱性溶液中呈蓝色,所以细胞核被染成蓝色。

细胞浆染色的原理:

伊红是一种化学合成的酸性染料,在一定条件下可使细胞浆着色。细胞浆的主要成分是蛋白质,为两性化合物,细胞浆的染色与染液的pH值密切相关。当染色液pH值在胞浆蛋白质等电点(4.75.0)以下时,胞浆蛋白质以碱式电离,则细胞浆带正电荷,就可被带负电荷的酸性染料染色。伊红在水中离解成带负电荷的阴离子,与胞浆蛋白质带正电荷的阳离子结合,使细胞浆着色,呈现红色。

分化作用:

染色后,用某些特定的溶液将组织过多结合的染色剂脱去,这个过程称为分化作用,所用的溶液称为分化液。在HE染色中常用1%盐酸乙醇作为分化液,因酸能破坏苏木素的醌型结构,使组织与色素分离而退色。大多数组织经苏木素染色后,必须用1%盐酸乙醇分化,使细胞核过多结合的苏木素染料和细胞浆吸附的苏木素染料脱去,再进行伊红染色,才能保证细胞核与细胞浆染色的分明。

返蓝作用:

分化之后,苏木素在酸性条件下处于红色离子状态,呈红色;在碱性条件下处于蓝色离子状态,呈蓝色。组织切片经酸性乙醇分化后呈红色或粉红色,立即用水除去组织切片上的酸而中止分化,再用弱碱性水使苏木素染上的细胞核呈现蓝色,这个过程称为返蓝作用或蓝化作用。另外用自来水浸洗也可使细胞核返蓝,但所需时间较长。

自备材料:

1、盐酸乙醇分化液

2、蓝化液,如稀氨水、碳酸锂溶液等

3、系列乙醇

4、伊红染色液

54%多聚甲醛

注意事项:

切片脱蜡应尽量干净。

系列乙醇应经常更换新液。

盐酸乙醇分化时间应根据切片厚薄、组织类别以及新旧而定,另外分化后自来水冲洗时间应该足够,以便彻底清洗酸。

乙醚-乙醇混合固定液是由乙醚和95%乙醇等量混合而得,再加入适量乙酸,密闭保存。

冷冻切片染色时间尽量要短。

蓝化液常使用0.21%氨水或Scott促蓝液或0.11%碳酸锂溶液。

为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

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