小鼠精原干细胞
产品简介 :
产品名称 :小鼠精原干细胞
产品品牌 :晶抗生物
组织来源 :睾丸组织
产品规格 :5×105cells/T 25细胞培养瓶
细胞简介 :
小鼠精原干细胞分离自睾丸组织。精原干细胞是位于睾丸生精小管的生精上皮内的一群生精干细胞,是成体内的定向干细胞。精原干细胞的一些独特优势使其成为动物转基因的理想宿主细胞。精原干细胞的生理生化特性及其分裂增殖、分化等多项生命活动的调节机制的深入研究,精子发生机理的进一步阐明以及精原干细胞转染,异体、异种移植技术的实际应用,都迫切需要找到一种可行的方法将其分离纯化,以期得到较高产量和纯度的有活力的精原细胞用于体外培养。
在哺乳动睾丸内,精子发生时一个受高度调控和持续的过程,精原干细胞(SSC s) 一方面进行自我更新维持干细胞数量,另一方面又不断执行分化成各级生精细胞直至生成精子。精原干细胞定居在曲精细管上皮的基膜处,是哺乳动物精子发生的最原始细胞,也是动物体内一起能将遗传信息传递的干细胞。精原干细胞体外培养体系的建立,在生物学、医学、畜牧业生产及制备转基因动物等领域具有广阔的应用前景。精原干细胞(SSC s) 是生精上皮近基底膜的一群细胞,具有自我更新能力和多向分化潜能,是哺乳动物体内唯一能将遗传信息传递给下一代的成体干细胞。
方法简介 :
晶抗生物实验室分离的小鼠精原干细胞采用先机械吹打、后胰蛋白酶消化,结合晶抗生物密度梯度离心法制备而来,细胞总量约为5×105cells/瓶。
质量检测 :
晶抗生物实验室分离的小鼠精原干细胞经c-kit免疫荧光鉴定,纯度可达90% 以上,且不含有H IV -1、H BV 、H C V 、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养信息 :
培 养 基 :含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptom ycin等
换液频率 :每2-3天换液一次
生长特性 :贴壁
细胞形态 :梭形、圆形
传代特性 :可传1-2代
传代比例 :1:2
消 化 液 :0. 25% 胰蛋白酶
培养条件 :气相:空气,95% 。C O2,5%
小鼠精原干细胞体外培养周期有限。建议使用晶抗生物配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的最佳培养状态。
细胞培养状态 :
发货时发送细胞电子版照片
使用方法 :
小鼠精原干细胞是一种贴壁细胞,细胞形态呈梭形、圆形,在晶抗生物技术部标准操作流程下,细胞可传1-2代。建议您收到细胞后尽快进行相关实验。
客户收到细胞后,请按照以下方法进行操作 :
1. 取出T 25细胞培养瓶,用75% 酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5% C O 2、饱和湿度的细胞培养箱中静置3-4h,以稳定细胞状态。
2. 贴壁细胞消化
1) 吸出T25细胞培养瓶中的培养基,用PBS清洗细胞一次。
2) 添加0. 25% 胰蛋白酶消化液1m L至T 25培养瓶中,轻微转动培养瓶至消化液覆盖整个培养瓶底后,吸出多余胰蛋白酶消化液,37℃温浴1-3min。倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后,再加入5ml完全培养基终止消化。
3) 用吸管轻轻吹打混匀,按传代比例接种T25培养瓶传代,然后补充新鲜的完全培养基至5m L,置于37℃、5% C O 2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养。
4) 待细胞完全贴壁后,培养观察。之后按照换液频率更换新鲜的完全培养基。
3. 细胞实验
因原代细胞贴壁特殊性,贴壁的原代细胞在消化后转移至其他实验器皿(如玻璃爬片、培养板、共聚焦培养皿等)时,需要对实验器皿进行包被,以增强细胞贴壁性,避免细胞因没贴好影响实验。包被条件常选用鼠尾胶原Ⅰ(2-5μg/cm2) ,多聚赖氨酸PLL(0. 1m g/m l),明胶(0. 1% ),依据细胞种类而定。悬浮/半悬浮细胞无需包被。
注意事项 :
1. 培养基于4℃条件下可保存3-6个月。
2. 在细胞培养过程中,请注意保持无菌操作。
3. 传代培养过程中,胰酶消化时间不宜过长,否则会影响细胞贴壁及其生长状态。
4. 建议客户收到细胞后前3天每个倍数各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和晶抗生物技术部沟通。由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们晶抗系,详尽告知细胞的具体情况,以便我们的技术人员跟踪、回访直至问题得到解决。