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    小鼠肠微血管内皮细胞

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JLC-E0477 5×105cells 准现货 询价
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小鼠肠微血管内皮细胞
产品简介 :
产品名称 :小鼠肠微血管内皮细胞
产品品牌 :晶抗生物
组织来源 :小肠组织
产品规格 :5×105cells/T 25细胞培养瓶


细胞简介 :

小鼠肠微血管内皮细胞分离自肠道组织。肠道指的是从胃幽门至肛门的消化管。肠是消化管中最长的一段,也是功能最重要的一段。哺乳动物的肠包括小肠、大肠和直肠3大段。大量的消化作用和几乎全部消化产物的吸收都是在小肠内进行的,大肠主要浓缩食物残渣,形成粪便,再通过直肠经肛门排出体外。肠道堪称身体最劳累的器官——每天不停地消化、吸收食物,以提供足够的养分,其实它的功能还远不止此——它还是机体内最大的微生态系统。

微血管是极细微的血管,管径平均为6-9μm ,连于动、静脉之间,互相连接成网状。微血管壁薄,管径较小,血流很慢,通透性大。其功能是利于血液与组织之间进行物质交换。其管壁主要由一层内皮细胞构成,在内皮外面有一薄层结缔组织。另外还常可见到一种扁而有突起的细胞贴在微血管的管壁外面,称为周细胞。


方法简介 :

晶抗生物实验室分离的小鼠肠微血管内皮细胞采用胰蛋白酶-胶原晶抗合消化法结合差速贴壁法、并通过内皮细胞专用培养基培养筛选制备而来,细胞总量约为5×105cells/瓶。


质量检测 :

晶抗生物实验室分离的小鼠肠微血管内皮细胞经C D 31免疫荧光鉴定,纯度可达90% 以上,且不含有H IV -1、H BV 、H C V 、支原体、细菌、酵母和真菌等。


培养信息 :

包被条件 :PLL(0. 1m g/ml) ,明胶(0. 1%) 
培 养 基 :含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptom ycin等
换液频率 :每2-3天换液一次
生长特性 :贴壁 
细胞形态 :内皮细胞样 
传代特性 :可传2-3代 
传代比例 :1:2
消 化 液 :0. 25% 胰蛋白酶
培养条件 :气相 :空气,95% 。C O2,5%
小鼠肠微血管内皮细胞体外培养周期有限。建议使用晶抗生物配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的最佳培养状态。


细胞培养状态 :

发货时发送细胞电子版照片


使用方法 :

小鼠肠微血管内皮细胞是一种贴壁细胞,细胞形态呈内皮细胞样,在晶抗生物技术部标准操作流程下,细胞可传2-3代。建议您收到细胞后尽快进行相关实验。


客户收到细胞后,请按照以下方法进行操作 :

1. 取出T 25细胞培养瓶,用75% 酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5% C O 2、饱和湿度的细胞培养箱中静置3-4h,以稳定细胞状态。
2. 贴壁细胞消化
1) 吸出T25细胞培养瓶中的培养基,用PBS清洗细胞一次。
2) 添加0. 25% 胰蛋白酶消化液1m L至T 25培养瓶中,轻微转动培养瓶至消化液覆盖整个培养瓶底后,吸出多余胰蛋白酶消化液,37℃温浴1-3min。倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后,再加入5ml完全培养基终止消化。
3) 用吸管轻轻吹打混匀,按传代比例接种T25培养瓶传代,然后补充新鲜的完全培养基至5m L,置于37℃、5% C O 2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养。
4) 待细胞完全贴壁后,培养观察。之后按照换液频率更换新鲜的完全培养基。
3. 细胞收货脱落
1) 收集所有细胞悬液,1000rpm ,离心5min,保留沉淀。
2) 添加0. 25% 胰蛋白酶消化液0. 5m L至离心管中,重悬沉淀,放置于37℃消化3min (或4℃冰箱静置5-7min) 。消化完向离心管内加入5ml完全培养基终止消化。
3) 经1000rpm ,离心5min,丢弃上清,用5ml完全培养基(补加1% FBS,促进贴壁) 重悬沉淀,接种于新的培养瓶内。
4) 待细胞完全贴壁后,培养观察。之后按照换液频率更换新鲜的完全培养基(37℃预热) 。
4. 细胞实验
因原代细胞贴壁特殊性,贴壁的原代细胞在消化后转移至其他实验器皿(如玻璃爬片、培养板、共聚焦培养皿等)时,需要对实验器皿进行包被,以增强细胞贴壁性,避免细胞因没贴好影响实验。包被条件常选用鼠尾胶原Ⅰ(2-5μg/cm2) ,多聚赖氨酸PLL(0. 1m g/m l),明胶(0. 1% ),依据细胞种类而定。悬浮/半悬浮细胞无需包被。


注意事项 :

1. 培养基于4℃条件下可保存3-6个月。
2. 在细胞培养过程中,请注意保持无菌操作。
3. 传代培养过程中,胰酶消化时间不宜过长,否则会影响细胞贴壁及其生长状态。
4. 建议客户收到细胞后前3天每个倍数各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和晶抗生物技术部沟通。由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联系,详尽告知细胞的具体情况,以便我们的技术人员跟踪、回访直至问题得到解决。

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