一、基本信息 |
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细胞名称 |
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细胞品牌 |
江蓝纯生物 |
种属来源 |
大鼠 |
组织来源 |
脑 |
生长特性 |
贴壁生长 |
细胞形态 |
神经元细胞样 |
细胞简介 |
大鼠脊髓神经元细胞采用胶原酶&胰酶联合消化法、神经元专用培养基培养筛选结合化学试剂抑制法制备而来。大鼠脊髓神经元细胞分离自脊髓组织;脊髓是细细的管束状的神经结构,位于脊柱的椎管内且被脊椎保护;是源自脑的中枢神经系统延伸部分。中枢神经系统的细胞依靠复杂的联系来处理传递信息。脊髓的主要功能是传送脑与外周之间的神经信息。人和脊椎动物中枢神经系统的一部分,在椎管里面,上端连接延髓,两旁发出成对的神经,分布到四肢、体壁和内脏。脊髓的内部有一个H形(蝴蝶型)灰质区,主要由神经细胞构成;在灰质区周围为白质区,主要由有髓神经纤维组成;脊髓是许多简单反射的中枢。脊髓两旁发出许多成对的神经(称为脊神经)分布到全身皮肤、肌肉和内脏器官。脊髓是周围神经与脑之间的通路,也是许多简单反射活动的低级中枢。按脊神经的出入可把脊髓也分为相应的31节,31对脊神经就是由不同的脊椎发出的。神经系统最基本的结构和功能单位是神经元,即神经细胞,其大小和外观在中枢神经系统中差异很大。但都具有胞体和树突、轴突。胞体又叫核周体,内含神经丝、微管、内质网、游离核糖体和一个有明显核仁的核。一些大神经元突起的粗面内质网可用Nissl染色显示,在光镜下是灰蓝色斑块状,称为尼氏小体。树突和轴突是神经元的突起,能在神经元之间传递电冲动,突起的大小和形态各不相同,很难用常规的显微镜鉴别。脊髓组织内含有大量胶质细胞,神经元含量少,分离纯化难度大,且脊髓神经元细胞是高度分化的终末细胞,不能分裂增殖,培养要求高。刚接种的脊髓神经元呈圆形,体积小,透亮,无突起。培养2-3d,可见胞体增大,突起增多延长;培养6-7d,细胞体大饱满,突起明显增加延长并交织成网,光晕明显,立体感强。培养20d后,死亡细胞明显增加,细胞出现内空泡,突起粗细不均,甚至脱壁,发生细胞崩解。 |
质量检测 |
NSE免疫荧光染色为阳性,纯度高于 90%,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等 |
细胞规格 |
5x10⁵cells/T25或1mL冻存管 |
培养基 |
大鼠脊髓神经元细胞专用培养基 |
培养条件 |
气相:95%空气+5%二氧化碳;温度:37℃ |
换液频率 |
每2-3天换液一次 |
消化液 |
0.25%胰蛋白酶 |
细胞货期 |
6周左右 |
发货方式 |
复苏发货(免运输费用)/ 冻存发货(需加干冰运输费用) |
供应范围 |
仅限于科研实验使用,绝不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用 |
特别说明 |
具体操作步骤以随货产品说明书为主 |
二、细胞培养操作 |
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收货处理 |
取出T25细胞培养瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2,饱和湿度的细胞培养箱中静置3-4h,以稳定细胞状态 |
传代密度 |
细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养 |
传代代数 |
属于终末分化细胞;属于不增殖细胞群,建议收到细胞后尽快进行相关实验 |
传代比例 |
首次传代建议1:2传代,1:2传代就是1个T25瓶传2个T25瓶或者2个6cm皿。不是1个T25瓶传2个10cm皿 |
传代方法
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1. 吸出T25细胞培养瓶中的培养基,用PBS清洗细胞一次; 2. 添加0.25%胰蛋白酶消化液1mL至T25培养瓶中,轻微转动培养瓶至消化液覆盖整个培养瓶底后,吸出多余胰蛋白酶消化液,37℃温浴1-3min;倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后,再加入5ml完全培养基终止消化; 3. 用吸管轻轻吹打混匀,按1:2比例接种T25培养瓶传代,然后补充新鲜的完全培养基至5mL,置于37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养; 4. 待细胞完全贴壁后,培养观察;之后每2-3天换液一次新鲜的完全培养基。 |
三、注意事项 |
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重要提醒 |
1.培养基于4℃条件下可保存3-6个月。 2.在细胞培养过程中,请注意保持无菌操作。 3.传代培养过程中,胰酶消化时间不宜过长,否则会影响细胞贴壁及其生长状态。 4.运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞,请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。 |
到货须知 |
1.收到细胞后,首先观察并拍照记录细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,干冰运输的细胞检查干冰是否完全挥发,细胞是否解冻,若有上述现象发生请及时和我们联系。 2.静置完成后,取出细胞培养瓶,镜检、拍照(当天以及第 2,3 天请拍照),记录细胞状态 (所拍照片将作为后续服务依据);建议细胞传代培养后,定期拍照、记录细胞生长状态。 3.由于运输的原因,部分细胞由于温度变化及剧烈碰撞死亡破碎形成碎片,是正常现象。个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联系,告知细胞的具体情况,以便我们的技术人员跟踪回访直至问题解决。 4.仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等,确保细胞培养条件一致,若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题,责任由客户自行承担。 |
四、售后服务 |
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细胞予重发 |
1. 细胞运输中遭遇的各种问题,细胞丢失瓶身破损、培养液严重漏液等,重发。 2. 收到细胞未开封,如出现污染状况,重发。 3. 收到细胞3天内,发现污染问题,经核实后,重发。 4. 常温发货的细胞静置2小时后,干冰冻存发货的细胞复苏2天后,绝大多数细胞未存活,经核实后,重发。 5. 常温发货的细胞静置22小时并且未开封或干冰冻存发货的细胞复苏2天后,出现污染,经核实后,重发。 6. 细胞活性问题,请在收到产品3天内给我们提出真实的实验结果,用台盼蓝染色法鉴定细胞活力,经核实后,重发。 |
细胞不重发 |
1. 客户操作造成细胞污染,不重发。 2. 客户严重操作失误致细胞状态不好,不重发。 3. 非我们推荐细胞培养体系致的细胞状态不好,不重发。 4. 细胞状态不好,未提供真实清晰的培养前3天的细胞状态照片,不重发。 5. 细胞培养时经其它处理导致细胞出现问题的,不重发。 6. 收到细胞发现问题与客服人员沟通的时间证明大于3天的,不重发。 |