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    SF9昆虫卵巢细胞

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SF9昆虫卵巢细胞
细胞简介 :
Growth Properties(生长特性): 贴壁 
Organism(生物体):  草地贪夜蛾
Source(来源):  卵巢;自发永生;雌性
Complete growth medium:  Grace’s Insect Medium(supplemented),90%;FBS,10%;双抗。
Temperature:  28°C
Atmosphere:  air, 100%


细胞培养操作步骤 :

1.混匀细胞,收集细胞悬液1000rpm(150g左右)离心3min,弃上清;

2.加入新鲜完全培养基轻轻重悬细胞,并均匀分到培养皿里;Note: 为避免细胞传代死亡,传代前细胞培养基不能完全变黄,细胞密度过高时及时换液以免细胞死亡。传代过程吹打细胞应尽量轻柔,不应吹出过多气泡。3.28度培养箱继续培养;

传代比例 : 视细胞生长速度而定,大部分细胞适用1:3-1:4传代。


细胞保存 :

1.冻存液:92%完全培养基+8%DMSO(可以根据实验室条件自行选择)
2.降温步骤:4度10min,-20度2h,-80过夜后液氮保存。


小提示 :

1、细胞收货后尽快拍照留存,以便处理售后问题。对细胞状态有问题当天联系,若收货后未联系或无照片视为细胞状态良好,客户传代后状态不佳将无法提供免费重发服务。
2、自细胞签收起一周之内细胞自身出现问题(不包含客户自身原因导致的),提供收货的细胞状态图片及培养方式反馈给订单业务员。若客户在出现问题的时候不经我方同意,擅自将细胞遗弃,将视为客户自身失误导致细胞出现问题,我方不提供免费重发服务。
3、细胞经过运输后,部分细胞由于温度变化及剧烈碰撞死亡破碎形成碎片,是正常现象。贴壁细胞可以消化,悬浮细胞直接混匀收集细胞,900-1000rpm(约150g)离心3min,弃上清。再加5ml PBS重悬细胞,再离心后,用完全培养基重悬接种到新的培养皿。第二次PBS重悬是为了去除碎片,如果平时碎片比较少,传代时可以省略PBS重悬的步骤;如果碎片很多,建议PBS多洗几次。 
4、对于生长缓慢的细胞:可采用适当的提高培养基中血清浓度,最高不超过20%,或隔数日换液的方法来保证细胞的状态和生长速度。
5、对于生长不均的贴壁细胞:在培养过程中若出现细胞分布明显不均时(即某一区域细胞已重叠生长,而旁边则为一块空白),此时可将细胞进行消化,重新打散,贴壁,加入新培养基进行培养。
6、使用不同胰酶及其他试剂的消化时间相差较大,不强行要求消化时间,20s-10min均有,总体以细胞收缩相互分离并可以轻轻吹下为准终止消化。若无法准确掌控胰酶作用时间 建议客户按照下述操作:胰酶首先复温到室温后加入细胞,然后每隔20-30秒,即吹打下细胞,如果能够吹打散细胞,加入完全培养基终止消化,如果30秒吹打不下,再等30秒重复操作。
7、冻存细胞时冻存液培养客户可以根据实际情况决定,我方冻存液配方仅供参考,冻存细胞后一定要复苏其中一支检测冻存效果。对于客户冻存细胞出现死亡,我方不提供售后服务。
8、使用干冰发货的细胞,均发两支冻存细胞。请不要一起复苏,仅复苏一支,将一支存放在-80冰箱或者液氮里。如复苏有问题,及时联系我方,并在我方指导下复苏另外一支。若客户同时复苏两支,且细胞状态不理想,我方无法提供免费重发服务。
9、请严格按照随细胞说明书进行培养,如有不清楚的地方,请及时联系订单业务员。勿随意更换非随货说明书的其他培养基进行培养,出现问题我方无法提供免费重发服务。


售后规定 :

本公司仅对细胞本身问题负责,不对客户传代导致细胞密度过低、细胞漂浮、生长缓慢形态改变甚至污染负责。由于客户不按要求进行细胞操作、使用培养基或者客户传代后胞污染、生长缓慢甚至死亡等原因导致售后,不予免费售后。
细胞售后期:自细胞签收起一周之内。
超出售后期,且在一个月之内,细胞出现问题,无论何种原因需重发细胞,收取细胞购买费用的半价。 超出细胞售后期,自签收起六个月之外的,细胞出现任何问题,不再提供技术支持或者售后。

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