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  • 一氧化氮合成酶(INOS)活性分型试剂盒100管/48样

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JLC_K14877 100管/48样 3-7天 询价
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一氧化氮合成酶(INOS)活性分型试剂盒100管/48样

测定意义
一氧化氮合成酶（NitricOxideSynthase，NOS，EC 1.14.13.39）是生物体内催化L-精氨酸合成NO的一类酶， 主要存在于血管平滑肌、巨噬细胞、内皮细胞、神经细胞、肝细胞、肾小球膜细胞等各种细胞中。NO作为细胞信 息分子，在神经系统、免疫系统和心血管系统中起着重要的调节作用。
根据其酶活性对钙离子的依赖性不同，分为结构型NOS（constitutiveNOS，cNOS）和损伤诱导型NOS（inducible NOS，iNOS），前者需要一定浓度的钙离子方可激活，后者不依赖于外源钙离子。
测定原理
NOS催化L-精氨酸、分子氧和NADPH，生成NO和NADP+，NO在水溶液中极易氧化生成NO²-和NO³-。在酸性条件下，NO²-与重氮盐磺酸胺生成重氮化合物，进一步与萘基乙烯基二胺偶合，产物在550nm处有特征吸收峰，测定其吸光值，可以计算得到NOS活性大小。
需自备的仪器和用品
可见分光光度计/酶标仪、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、蒸馏水。
试剂的组成和配制

试剂名称

规格

保存条件

备注

提取液一

液体100mL×1

-20℃，保存

提取液二

液体1mL×3

-20℃，密封保存

缓冲液

液体20mL×1

2-8℃，保存

试剂一

粉剂×1

2-8℃，避光保存

临用前加入15mL缓冲液溶解

试剂二

液体1.5mL×1

-20℃，避光保存

试剂三

粉剂×1

-20℃，避光保存

临用前加1mL缓冲液溶解

试剂四

粉剂×1

-20℃，避光保存

临用前加1mL缓冲液溶解

试剂五

液体×1

2-8℃，避光保存

如有析出，可适当加热溶解

试剂六

液体×1

2-8℃，避光保存

用之前60℃加热震荡15min

标准品

液体

2-8℃，避光保存

10µmol/mL亚硝酸钠

预实验的意义

比色法检测试剂盒预实验非常重要
1、确定该试剂盒是否适合客户的样本检测，以免造成试剂盒和样本的浪费（比如低表达处理的样本）；
2、熟悉生化试剂盒的操作流程，尤其是初次使用生化试剂盒测定；
3、确定样本的处理方法及稀释倍数是否合适；
4、了解实验过程中可能出现的实验现象或问题，以便于及时作出调整；
5、通过3-5组预实验，判断试剂盒对于样本的适应稀释浓度范围，指导实验样本稀释比例。

注意
正式测定前务必取 3 - 5 个预期差异较大的样本做预测定。

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