甲基柠檬酸合酶(MCS)活性检测试剂盒微量法使用说明书-甲基柠檬酸合酶(MCS)活性检测试剂盒微量法操作注意事项

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JLC-E9402 -100T/48S	100T/48S	准现货	询价

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英文名称：MethylcitrateSynthase(MCS)ActivityAssayKit

储存条件：-20℃

产品包装：盒装

检测方法：微量法

有效期： 6个月

产品规格：100T/48S

产品组成：

溶液的配制：

1、试剂四：临用前加入0.5mL蒸馏水充分溶解，未用完的试剂-20℃分装保存4周，避免反复冻融。

2、试剂五：临用前加入1.5mL蒸馏水充分溶解，未用完的试剂-20℃分装保存4周，避免反复冻融。

产品说明:

甲基柠檬酸合酶（metheyl-citratesynthase，MCS）广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞的线粒体基质中，与柠檬酸合酶（CS）共同参与三羧酸循环的调节。

MCS催化丙酰CoA和草酰乙酸产生甲基柠檬酰辅酶A，进一步水解产生甲基柠檬酸；该反应促使DTNB转变成黄色的TNB，在412nm处有特征吸收峰，据此可以计算MCS活性。

注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验，如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。

需自备的仪器和用品：

可见分光光度计/酶标仪、微量玻璃比色皿/96孔板、天平、低温离心机、水浴锅、研钵/匀浆器/细胞超声破碎仪、冰和蒸馏水。

操作步骤

一、样本处理(可适当调整待测样本量)

1.组织：按照组织质量（g）：提取液体积（mL）为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL提取液）和10μL试剂一，进行冰浴匀浆。12000g，4℃离心10min，取上清置于冰上待测。

细菌/细胞：按照细菌/细胞数量（10⁶个）：提取液体积（mL）为5~10：1的比例（建议5百万细菌/细胞加入1mL提取液和10μL试剂一），冰浴超声波破碎（功率200W，超声3秒，间隔7秒，总时间5min）；然后12000g，4℃离心10min，取上清置于冰上待测。

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