英文名称 :Anthocyanidin Reductase Activity Assay Kit
储存条件 :-20℃
产品包装 :盒装
检测方法 :紫外分光光度法
产品规格 :50T/24S
有 效 期 :6个月
自备试剂 :该试剂盒实验过程中需自备试剂,详情见网站说明书
产品组成 :
试剂名称
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规格
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保存条件
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提取液
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液体30mL×1瓶
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2-8℃保存
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试剂一
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液体50mL×1瓶
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2-8℃保存
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试剂二
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粉剂×1瓶
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2-8℃保存
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试剂三
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粉剂×1瓶
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-20℃保存
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试剂四
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液体2 mL×1瓶
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2-8℃保存
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溶液的配制:
1 、提取液: 内含不溶物,使用前摇匀。
2 、试剂二:临用前加入 3mL 蒸馏水备用,-20℃可分装保存4周,避免反复冻融。
3 、试剂三:粉剂置于试剂瓶内玻璃管中。临用前加入1 mL乙醇和1mL蒸馏水混匀溶解备用。可以分装后-20℃保存4周,避免反复冻融。
产品说明:
花青素还原酶(ANR)是原花青素生物合成途径中的关键酶,使花色素转变为相应的顺式黄烷-3-醇,在植物 体内起着非常重要的调控作用。
NADPH在ANR作用下将花色素转化为黄烷-3-醇和NADP,在340nm下测定NADPH的减少速率,即可反映ANR 活性。
注意:实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验,如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品:
紫外分光光度计、低温离心机、水浴锅、可调式移液器、1mL石英比色皿、研钵/匀浆器、乙醇、冰和蒸馏水。
操作步骤
一、样本处理(可适当调整待测样本量)
1 、组织:称取约0. 1g组织,加入1mL提取液进行冰浴匀浆。12000g 4℃离心15分钟,取上清,置冰上待测。
2 、细胞或细菌样本的制备:先收集细胞或细菌样本到离心管内,弃上清,按照每 500 万细胞或细菌加入1mL提取液,超声波破碎细菌或细胞(功率 20% ,超声3s ,间隔10s ,重复30次)。12000g ,4℃离心15min ,取上清,置冰上待测。