英文名称 : α-Amylase(α-AL)Activity Assay Kit(Iodine-starch colorimetry)
产品包装 : 盒装
产品规格 : 50T/24S
储存条件 : -20℃
检测方法 : 可见分光光度法
有 效 期 : 6个月
产品组成:
试剂名称
|
规格
|
保存条件
|
试剂一
|
粉剂×1 瓶
|
2-8℃保存
|
试剂二
|
液体10mL×1支
|
2-8℃保存
|
试剂三
|
液体30mL×1瓶
|
2-8℃保存
|
标准品
|
粉剂×1瓶
|
2-8℃保存
|
溶液的配制:
1、试剂一:临用前加入12.5mL试剂三,置于常温水中并加热至煮沸,期间不断搅拌粉剂至溶解,用不完的 试剂2-8℃保存8周;
2、标准品:10 mg淀粉标准品。临用前加10 mL 试剂三, 置沸水浴中振荡溶解, 配成 1 mg/mL淀粉标准液, 2- 8℃保存四周。
产品说明:
淀粉酶负责水解淀粉,包括α-淀粉酶和β-淀粉酶。α-淀粉酶(EC 3.2.1.1)可随机地作用于淀粉中的α-1,4-糖苷键,生成葡萄糖、麦芽糖、麦芽三糖、糊精等还原糖,同时使淀粉的粘度降低,因此又称为液化酶。
α-淀粉酶催化淀粉分子中的α-1,4糖苷键水解,产生葡萄糖、麦芽糖以及糊精等,碘可以与未被水解的淀粉结合, 生成在570nm下有特征吸收峰的复合物,其深浅可计算出淀粉酶的活力单位。α-AL耐热,但是β-淀粉酶可在70℃ 钝化15min。因此粗酶液经过70℃钝化15min,就只有α-AL能够催化淀粉水解。
注意:实验之前建议选择 2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者 增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品:
可见分光光度计、恒温水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1mL玻璃比色皿,研钵/匀浆器、蒸馏水。
操作步骤:
一、样本处理(可适当调整待测样本量)
1、组织:称取约 0.1g 样本,加 1mL 蒸馏水匀浆;匀浆后在室温下放置提取15min,每隔5min振荡1次,使 其充分提取; 6000g,室温离心10min,吸取上清液即为淀粉酶原液。
2、液体:直接检测。(若有浑浊则离心后进行测定)