肌酸含量检测试剂盒可见分光光度法使用说明书-肌酸含量检测试剂盒可见分光光度法操作注意事项

生化试剂盒
其它系列

肌酸含量检测试剂盒可见分光光度法
货号：JLC-E9361

英文名：Creatine Content Assay Kit

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JLC-E9361 -50T/24S	50T/24S	准现货	询价

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产品信息

中文名称：肌酸含量检测试剂盒可见分光光度法

英文名称：Creatine Content Assay Kit

产品包装：盒装

产品规格：50T/24S

储存条件：-20℃

检测方法：可见分光光度法

有效期：6个月

产品内容：

试剂名称	规格	保存条件
提取液一	液体30mL×1瓶	2-8℃保存
提取液二	液体5mL×1瓶	2-8℃保存
试剂一	粉剂×2支	-20℃保存
试剂一稀释液	液体15 mL×1瓶	-20℃保存
试剂二	液体15mL×1瓶	-20℃保存
标准品	粉剂×1 支	2-8℃保存

溶液的配制：

试剂一：临用前加1mL乙醇溶解，-20℃可以保存2周，试剂若变为深棕色则不可再使用。

试剂一工作液：临用前根据样本量按试剂一：试剂一稀释液=40μL：560μL（共 600μL，约 3T）的比例进行配制，现配现用，当天用完；

标准品：1 mg 一水肌酸。临用前加入 1 mL 蒸馏水，充分溶解，即 1 mg/mL 一水肌酸标准储备液。用不完的试剂 4℃保存一个月。

产品说明：

肌酸(Creatine)是一种含氮化合物，自然存在于脊椎动物体内，能够辅助为肌肉和神经细胞提供能量。肌酸可由精氨酸(arginine)、甘氨酸(glycine)及甲硫氨酸(methionine)三种氨基酸合成，可由人体自行合成，也可以从食物中摄取。大约95%的肌酸存在于骨骼肌中，主要存在形式为磷酸肌酸。肌酸作为一种补充剂主要通过增加肌肉质量，增强运动表现能力。肌酸也被作为神经肌肉疾病的一种治疗药被广泛研究，它可能有助于保护神经和改善细胞生物功能状态。

肌酸酶偶联肌氨酸氧化酶，可将肌酸转化为甘氨酸、甲醛、过氧化氢，过氧化物酶催化过氧化氢氧化4-氨基安替比林偶联酚，生成有色化合物，在505nm有特征吸收峰。

注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。

需自备的仪器和用品：

可见分光光度计、低温离心机、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、研钵/匀浆器、冰和蒸馏水、超声破碎仪。

操作步骤：

一、样本处理(可适当调整待测样本量)

1. 组织：按照质量（g）：提取液一体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g，加入1mL提取液一）加入提取液一，冰浴匀浆后于4℃，12000g离心10min，取0.8mL上清液，再缓慢加入0.15mL提取液二，缓慢吹打混匀至无气泡产生，4℃ 12000g离心10min后取上清待测。

2. 细胞：按照细胞数量（106个）：提取液一体积（mL）为5~10：1的比例（建议5×106个细胞加入1mL提取液一），冰浴超声波破碎细胞（功率300w，超声3秒，间隔7秒，总时间3min）；于4℃，12000g离心10min，取0.8mL

上清液，再缓慢加入0.15mL提取液二，缓慢吹打混匀至无气泡产生，4℃ 12000g离心10min后取上清待测。

3. 血清（浆）等液体：取100μL液体加入1mL提取液一，4℃ 12000g离心10min，取0.8mL上清液，再缓慢加入0.15mL提取液二，缓慢吹打混匀至无气泡产生，12000g离心10min后取上清待测。

注：提取液二需缓慢加入，加入后会产生大量气泡，建议使用2mL EP管进行操作

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