英文名称 :Glutamate Synthase(GOGAT)Activity Assay Kit
产品包装 :盒装
产品规格 :50T/48S
储存条件 :-20℃
检测方法 :紫外分光光度法
有 效 期 :6个月
产品简介 :GOGAT主要存在于原核生物、酵母菌及高等植物非绿色组织的前质体中,和谷氨酰胺合成酶(GS)共同构成GS/GOGAT循环,参与氨同化的调控。GOGAT以NADH为电子供体,催化谷氨酰胺的氨基转移到α-酮戊二酸形成两分子的谷氨酸,NADH在340nm吸光度的下降速率可以反映GOGAT活性大小。
产品组成 :
试剂名称
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规格
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保存条件
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提取液
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液体60mL×1瓶
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4℃保存
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试剂一
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液体60mL×1瓶
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4℃保存
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试剂二
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粉剂×2支
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4℃保存
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试剂三
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粉剂×2支
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4℃保存
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标准品
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粉剂×2支
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-20℃保存
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溶液的配制:
工作液的配制:取试剂二、试剂三、试剂四各一支加入30mL试剂一中溶解,现用现配,可分装后-20℃保存,避免反复冻融。
注意:实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品:
紫外分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1mL石英比色皿、研钵/匀浆器、冰和蒸馏水。
操作步骤 :
一、样本处理(可适当调整待测样本量)
1、细菌或培养细胞:先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照细菌或细胞数量(10⁴个):提取液体积(mL)为500~1000:1的比例(建议500万细菌或细胞加入1mL提取液),超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次);10000g4℃离心10min,取上清,置冰上待测。
2、组织:按照组织质量(g):提取液体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL提取液),进行冰浴匀浆。10000g4℃离心10min,取上清,置冰上待测。